浅析兽医实验室检测能力比对

郑教雀

（宁德市动物疫病预防控制中心,福建 宁德 352100）

兽医实验室作为兽医工作的基础，是动物疫病防控机构的根基，承担着动物疫病诊断、检测、动物免疫状况监测等工作，为动物疫病防控部门提供技术保障，因此加强兽医实验室建设非常重要。兽医实验室检测能力比对工作在加强兽医实验室建设中有着重要作用，它不仅能加强兽医实验室质量控制、提高实验室检测能力，同时还能提高专业技术人员的业务水平，进而提高实验室的综合能力。

目前，我国兽医系统实验室采用的比对方案多为：将若干个已知结果或数值（真实值）的样品作为盲样分发给各实验室；之后收集各实验室的比对试验结果，与真实值比较；通过结果符合数量与比对总数，计算出符合率；最后以符合率评价各参与比对实验室的检测能力。此次我中心组织的比对试验所采用的比对方案与以往相比有所不同，本文将此次比对的其中一个项目做如下分析，以供同行参考。

1 比对范围及项目

本次实验室检测能力比对试验共8个县级兽医实验室参与；检测项目为猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体（PRRSX3 Ab）检测ELISA试验。

2 材料与方法

2.1 仪器与耗材

试验所需要的仪器及设备由参与比对的实验室各自准备，耗材（含缓冲液）由组织方统一准备。

2.2 试剂

猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒（PRRS X3 Ab）由北京爱德士元亨生物科技有限公司提供。

2.3 样品

2.3.1 制备。样品由北京爱德士元亨生物科技有限公司制备、分装、编号。做到各盲样的血清量相同、保证可进行重复性检测，盲样外观颜色无明显差异，并标定各样品的参考值。为保证比对的科学性，组织方对比对样品再次统一编号后，作为盲样发放使用。

2.3.2 保存与发放。在比对试验开始前，盲样由组织方密闭、低温保存。待各参比实验室人员、仪器设备到位后，统一发放。

2.4 试验方法

比对试验所采用的方法为依据《猪繁殖与呼吸综合诊断方法》（GB/T 18090-2008），并参照试剂盒使用说明书进行。8份盲样具体布局，按下表进行。

表1 口蹄疫O型抗体ELISA比对试验布局表

依据上表，要求各参比实验室，对提供的8份盲样进行3次重复试验，设置内部质控品4份，同时设立阴、阳性对照各2份；具体试验方法按照试剂盒使用说明书操作。完成试验后，立即出具、提交正式检测报告。

2.5 评判（分）标准

2.5.1 试验结果

雄安“新”区，“新”在创新。它着眼于培养高新技术产业，发展前沿科技，打造京津冀协同化创新发展平台。首先，新取得建设规划吸引了一批来自北京的高校、科研机构以及医疗机构等创新引擎，有利于雄安新区多元化科技城的打造。其次，雄安新区致力于发展包括如3D打印、机器人、芯片、高端装备、生物、新材料、新能源、航空、航天、交通、电子等在内的新兴产业，打造新的经济增长极。除此之外，雄安新区的建设也体现着可持续发展的新思维，其通过加强资源节约与环境保护，来促进区域的持续发展。雄安新区的创新不只局限于科技产业，它在教育、政府职能、机制体制方面的创新也在推动着京津冀地区的进一步发展[4]。

2.5.1.1 样品检测值。查看盲样猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测值是否在给定的参考值区间内，落在参考值区间内，判为结果准确并得分；检测值落在参考值区间外，则判为结果存在较大偏差，不得分。

2.5.1.2 样本重复性。根据3次重复试验检测值，计算出变异系数，查看变异系数的大小。如果变异系数≤10%，则判定为样本重复性好，得分；如果变异系数＞10%，则判定为样本重复性较差，不得分。

2.5.1.3 内部质控品。查看4个质控样品检测值是否满足限定区间。如果满足限定区间，得分；否则不得分。

2.5.1.4 阴阳性对照。阴阳性对照OD值在确保试验成立后，再验证其是否满足参考标准要求。如果满足要求，得分；否则不得分。

2.5.2 检测报告。查看各参比实验室所出具的正式检测报告。报告中每出现1个错误，扣除一定分数。比对试验具体分数评定标准，详见下表。

表2 口蹄疫O型抗体ELISA比对试验评分标准

3 结果分析

3.1 总体结果

参与此次比对的8个兽医实验室都能在规定时间内完成检测并提交正式报告。根据比对结果评判（分）标准，7个实验室的所有OD值在区间范围内，正确率为87.5%；6个实验室的所有变异系数（CV%）都小于10%，比例为75%。这说明大部分兽医实验室具备相应的检测能力，且技术操作稳定、重复性好、水平较高。

3.2 具体结果

8个实验室共检测样品192份·次，获得192个OD值，其中189个OD值处于给定的参考区间范围内，合格率达98.4%；样本重复性试验，共计获得64个变异系数（CV%），其中61个CV%值小于10%，重复性良好率达95.3%；阳性对照均合格。此外，3个实验室的4个质控样品检测值不在限定区间内、3个实验室的3个阴性对照未达参考标准。

3.3 检测报告

收到检测报告8份，每份报告均存在或大或小的问题。主要问题有：签、盖章不够规范，报告内容存在对应英文翻译错误，诊断试剂未写明具体厂家，未实行2级签字等。

具体得分结果详见表3。

表3 口蹄疫O型抗体ELISA比对试验得分统计表

4 讨论

血清学检测是目前基层兽医系统实验室的基本检测手段，本次比对的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测项目采用了ELISA检测方法，能客观的反应基层兽医实验室的技术水平；且此次比对试验采用统一的试剂、样品及标准，并现场立即收回检测结果，加以统计分析，更能真实地反映出各实验室的检测能力水平。

试验结果显示，7个实验室的合格率为100%，1个实验室的合格率为87.5%，说明该市兽医实验室检测人员的实际操作技能较强，整体检测能力较高。但通过此次比对试验的评比，也发现了各实验室存在的一些问题。

4.1 未严格按照规程操作。D实验室在收到样品后，未及时对样品进行编号登记，使得在后续试验过程中将样品弄混，是导致其出现检测不合格的主要原因。

4.2 检测报告不规范。各实验室出具的检测报告，存在格式不规范，内容存在瑕疵，表述不准确、审核程序不够健全等问题。

4.3 实验记录不规范。个别实验室检测报告所附的原始实验记录信息不完整，存在未使用正规试验表格，试验记录涂改、未实行二级签字等情况。

5 小结

检测能力比对工作具有极其重要的意义，因为检测能力不仅是动物防控部门建设的基础、更是兽医实验室生存之基，而且出具的检测报告是作为政府相关部门制定政策、执行决策的依据。各动物疫病预防控制机构要不断提高检测人员的技术水平，使得实验室检测更加科学、准确、规范，为重大动物疫病防控和食品卫生安全提供有力的技术支持。