荧光偏振免疫分析技术在病原检测中的应用研究进展

张萍，周玉成，程悦宁，程世鹏，杨艳玲

（中国农业科学院特产研究所，长春 130112）

荧光偏振（FP）由于其均匀的格式、速度、准确性和自动化的高通量能力，构成了包括临床、食品和环境[1-2]等各种应用领域对小分子进行常规分析的最有效的技术之一。荧光偏振免疫分析法（Fluorescen cepolarization immunoassay，FPIA）是基于对抗体结合位点的自由分析和荧光标记抗原的竞争的一种方法，其操作简单，易于自动化，适于快速筛选。因为分析物可以与高分子量的抗体结合，所以无需分离的步骤。目前，FPIA用于确定农业产品和环境样本中农药[3-4]、抗生素[5-7]和真菌毒素[8-9]的存在，且FPIA在病原检测方面也已经得到了广泛应用。笔者综述了荧光偏振免疫技术的发展历史、原理、优缺点和在病原检测中的应用，概括了近几年国内、外针对各种病原建立的荧光偏振免疫分析方法研究进展。

1 FPIA的发展历史

在20世纪初期，Perrin最初建立了荧光偏振检测方法。1954年，免疫分析就已成为临床化学和生物化学等领域中的一个重要方法。虽然放射标记免疫分析法具有特异性强、灵敏度高和使用范围广等优点，但放射危害以及标记物不稳定等缺点也很明显。在此研究基础上，陆续发展了酶免疫法、化学发光免疫法、荧光免疫法和电化学免疫法等免疫分析方法。这些方法在实际应用中，大多数使用非均相的免疫分析技术。非均相系统灵敏度高且特异性好，但操作过程复杂繁琐，受到限制。20世纪70年代，荧光偏振第一次应用到抗原抗体反应中，并用该法研究了生物系统中抗原-抗体和激素-受体之间的作用[10-11]。……