超高效液相色谱-串联质谱法和胶体金快速定量法测定牛奶中黄曲霉毒素M1比较

张振宇 柴 磊 李 明

（1.济源市畜产品质量监测检验中心，河南济源 459000；2.焦作市畜产品质量安全监测中心，河南焦作 454001）

1 前言

黄曲霉毒素M1（AFM1）是由常见的黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的代谢产物，其物理化学性质稳定。哺乳类动物摄入被AFB1污染的饲料后，在体内羟基衍生转化成AFM1。AFM1的危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。

牛奶中的黄曲霉毒素主要来源于饲料。黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为1类致癌物。我国规定牛奶中黄曲霉毒素 M1含量不得超过0.5 μg/kg。

2 材料与方法

2.1 材料与仪器

PBS 清洗缓冲液（Charm公司）；AFM1、AFM1-13C17标准液（Romer公司）；AFM1免疫亲和柱（Romer公司）；玻璃纤维滤纸（Whatman公司）；ROSA黄曲霉毒素M1胶体金快速定量检测条（Charm公司，检测限0.5μg/kg）。

UPLC-Xevo TQ MS型超高效液相色谱-串联质谱仪（Waters公司）；孵育器、读数仪（Charm公司）。

2.2 方法

2.2.1 免疫亲和层析净化超高效液相色谱-串联质谱法

（1）样品前处理

牛奶中的黄曲霉毒素M1含量测定一般按照GB 5009.24-2016《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M族的测定》第一法 同位素稀释液相色谱-串联质谱法进行测定。

（2）液相色谱条件

色谱柱：CORTECS UPLC C18 Column，（1.6 μm，2.1 mm X 100 mm）；流动相A为乙腈；流动相B为0.2%甲酸水梯度洗脱；柱温为40℃；进样量为5μl。

（3）质谱条件

电离方式：电喷雾正离子模式；多反应监测模式采集；毛细管电压2.7kV离子源温度为150℃；脱溶剂气温度为500℃；脱溶剂气流量为1000L/h。

2.2.2 胶体金快速定量法

分别准确量取300μl待测样品、阴性质控样品、阳性质控样品加入胶体金检测试纸条的加样孔中，放入已预热孵育器中孵育，孵育8 min后取出检测试纸条观察C线（质控线）和T线（检测线）显色情况。……