一株采油用嗜热特基拉芽孢杆菌厌氧生长代谢研究

林军章，冯 云，谭晓明，王 静，汪卫东，李希明

(中国石油化工股份有限公司胜利油田分公司 石油工程技术研究院，山东 东营 257000)

引 言

微生物采油分为内源微生物采油和外源微生物采油，后者是指将具有采油功能的微生物在地面发酵后注入到油藏中进行驱油的技术，该技术主要针对内源微生物匮乏的油藏，具有目标功能菌明确的优势[1-6]，外源微生物油藏适应性是其能否在油藏内发挥作用的关键。油藏作为厌氧环境，微生物厌氧生长代谢能力决定其油藏适应性和驱油性能。前期多数外源菌采油相关性能研究都是在好氧条件下开展[7-10]，而严格厌氧条件下的外源菌生长代谢以及调控方法研究较少，本文以一株嗜热特基拉芽孢杆菌为对象，对其在厌氧条件下的生长代谢及调控方法进行研究，为该类菌株在采油中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 菌种及来源

实验用菌株分离自胜利油田60 °C油藏产出液中，现保存于中石化微生物采油重点实验室的菌种保藏中心。菌株经16SDNA测序鉴定为嗜热特基拉芽孢杆菌(Bacillustequilensis)。

1.2 培养基

基础培养基：葡萄糖4 g/L，酵母粉1 g/L，蛋白胨 1 g/L，磷酸氢二钾3 g/L。

优化培养基：添加硝酸钠作为电子受体，在上述基础培养基中分别添加0 g/L，1 g/L，3 g/L，6 g/L的硝酸钠。

1.3 方法

1.3.1 菌株厌氧培养方法

采用亨盖特微生物厌氧操作平台进行微生物厌氧培养基制备和培养，实验步骤为：①在250 mL厌氧培养瓶中装入100 mL培养基；②厌氧瓶中用高纯氮气除氧，分装后密闭120 °C灭菌；③灭菌后培养基中接种5 mL菌株种子液，60 °C培养，不同时间取样分析。……