人SIRT6蛋白的原核表达及纯化

罗沙柳，任鑫鑫，罗菲，梁迎春，马超，刘坤，冉芳，施亚娇，李玲，叶棋浓

1.贵州大学 医学院，贵州 贵阳550025；2.军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所，北京100850；3.山西医科大学 第二医院，山西 太原030000；4.大连医科大学 肿瘤干细胞研究院，辽宁 大连，116044；5.中部战区总医院 卫勤部科训科，湖北 武汉430072

Sirtuins（SIRT）家族中的沉默信息调节因子2（silent information regulator 2，Sir2）最早在酵母中被发现[1]。迄今，科学家们在哺乳动物中已经确定 了7种与Sir2 同 源的基因，即SIRT1～SIRT7[2]。人类的SIRT6基因位于染色体19P13.3 区域，包括8个外显子，编码的蛋白全长355个氨基酸残基，相对分子质量39×103，等电点9.12[3]。SIRT6 最初被认为是单-ADP-核糖基转移酶，可以通过分子内机制完成放射性标记的转移，这表明SIRT6 可能利用ADP-核糖基化来自动调节自身活性，但是其最主要作用还是作为组蛋白脱乙酰酶[4-9]。

目前研究证明，SIRT6在基因组稳定性、代谢、染色质调控、端粒完整性、基因转录和糖脂代谢等方面都起关键调控作用，调节糖尿病、心脏病、肥胖、癌症及寿命、衰老等相关病理生理的发生发展[10-12]。SIRT6在体内控制许多代谢途径，包括糖酵解、糖异生、甘油三酯合成和LDL-胆固醇稳态，SIRT6 缺乏导致主要代谢缺陷[13-16]。对于癌症，SIRT6 可以通过多种机制发挥抑癌作用，敲除SIRT6的小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）比野生型MEF细胞生长增殖快，且敲除SIRT6 有促进肿瘤发生的作用[13]；敲除SIRT6基因的肿瘤细胞的乳酸生成、葡萄糖摄取等均增加[17]。对116例乳腺癌病人的组化分析显示SIRT6 高表达的病人生存预后差，SIRT6 通过调控FOXO的表达降低肿瘤细胞对化疗药的敏感性；……