淫羊藿女贞子配伍提高哮喘大鼠对地塞米松作用的敏感度研究

高莹莹 唐秀凤 李晓曦 陈宇恒 于 萍 刘仁慧

哮喘是以气道慢性炎症为特征的呼吸系统的常见疾病之一，目前发生率和致死率逐年上升，并在全世界范围内都严重威胁公众健康[1]。哮喘治疗的首选药物糖皮质激素(glucocorticoids，GC)虽有强大的抗炎作用，但长期或大剂量应用却容易造成严重的难以解决的不良反应[2]。GC作为为甾体激素，发挥抗炎作用的机制是结合胞质内的糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor，GR)，启动基因转录进程，合成相应的发挥抗炎作用的蛋白质[3]。胞质内GR在未被激活时结合2分子的热休克蛋白90(heat shock protein 90，HSP90)，使GR维持预备结合的状态[4]。笔者在前期实验研究中发现，淫羊藿女贞子合用地塞米松对卵蛋白诱导的哮喘大鼠能产生协同抗炎、下丘脑-垂体-肾上腺轴及提高GR的结合力，并证实中药合用布地奈德气道吸入缓解哮喘的机制与调整GR/HSP90的比值有关[5～7]。但对淫羊藿女贞子合用全身给药的GC——地塞米松对GR/HSP90的影响作用尚未明确。

材料与方法

1.实验动物：雄性 SD 大鼠，SPF 级，体重120±10g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，实验动物许可证号：SCXK(京)2012-0001。

2.试剂与药品：卵清白蛋白(美国 Sigma公司，A5253-250G)，氢氧化铝(北京化工厂，批号：20120028)，地塞米松磷酸钠注射液(5毫克/支，国药集团容生制药有限公司，批号：H41020036)，HSP 90、GRα一抗，均购自英国Abcam公司，GRβ一抗(biorbyt，E10827)；小鼠抗β-actin抗体、羊抗兔IgG、羊抗小鼠IgG、 DAB显色液均购自中杉金桥，RIPA裂解液(Solarbio，20150517)，Trizol购自美国Invitrogen公司，M-MLV反转录酶、dNTP(10mmol/L)、Ex TaqMix，均由宝生物工程(大连)有限公司提供，引物由上海生工有限公司合成。

3.仪器：402A超声雾化器(江苏鱼……