沉默FoxM1通过促进线粒体释放细胞色素C诱导口腔鳞癌细胞凋亡*

王晓庚，刘 林，左 健，张非煜，李若萱

(首都医科大学附属北京安贞医院口腔科， 北京 100029)

口腔鳞癌是发生于头颈部的常见恶性肿瘤，目前以手术治疗和放化疗等为主要治疗手段，这些治疗方法取得了一定的效果，但是中晚期的口腔鳞癌患者生存率仍然不高，因此探讨口腔鳞癌发病机制，寻找靶基因提高口腔鳞癌患者生存率是目前的重点[1-2]。叉头框蛋白M1 (forkhead box protein M1, FoxM1)是一种转录调控因子，在增殖活性较高的细胞中高表达，而在静止期的细胞中表达水平极低，参与胚胎发育、成人组织自我更新、细胞增生等过程，具有抗衰老和促进损伤修复等作用[3]。目前在多种肿瘤组织中发现FoxM1高表达，FoxM1具有促进肿瘤生长作用，FoxM1表达升高的肿瘤主要有前列腺癌、肺癌、口腔鳞癌和血液系统肿瘤等，FoxM1表达水平的高低与肿瘤患者分期和分级等有关[4-5]。目前在宫颈癌、喉癌和乳腺癌等癌细胞中已经证实，沉默FoxM1表达具有诱导肿瘤细胞凋亡作用，而其在口腔鳞癌细胞凋亡中的作用尚不清楚[6-8]。本实验通过沉默口腔鳞癌SCC9细胞中FoxM1的表达，探讨其在口腔鳞癌细胞凋亡中的作用，以期为靶向基因治疗口腔鳞癌提供参考资料。

材 料 和 方 法

1 材料

胞浆蛋白提取试剂盒和线粒体蛋白提取试剂盒购自生工生物工程(上海)股份有限公司；FoxM1-shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒由汉恒生物技术(上海)有限公司构建包装；RevertAid 第一链cDNA Synthesis试剂盒和Power SYBR Green PCR Master Mix试剂盒购自Thermo Scientifc；抗细胞色素C(cytochrome C)、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9抗体购自Abcam；口腔鳞癌SCC9细胞购自湖南丰晖生物科技有限公司；……