上皮间质转化与卵巢癌细胞顺铂耐药的相关研究*

张为家,苏小岩,李 爽,曾 海,2△

(1.长江大学附属第一医院肿瘤科，湖北荆州 434000;2.武汉大学中南医院肿瘤放化疗科，武汉 430071)

卵巢癌发病率居女性生殖系统恶性肿瘤第三位，病死率高居第一位，全球每年因卵巢癌死亡的患者约14万[1]。卵巢癌起病隐匿、早期症状不典型，使得多数卵巢癌患者确诊时已为晚期，手术难以彻底清除肿瘤病灶。以铂类药物为基础的联合化疗是晚期卵巢癌的一线治疗方式，然而多数患者在化疗过程中产生耐药，导致肿瘤复发转移，这是卵巢癌治疗失败的重要原因之一[2-3]。因此，探索卵巢癌顺铂耐药的分子机制成为卵巢癌研究的难点与热点。

上皮间质转化(EMT)是指上皮细胞在内外因素刺激下转化为具有间充质表型的生物学过程。最新研究表明，EMT与肿瘤转移、肿瘤干细胞形成及肿瘤耐药等多种恶性生物学行为密切相关[4-5]。目前，关于卵巢癌顺铂耐药与EMT之间的关系研究较少。本研究建立卵巢癌顺铂耐药细胞株，比较耐药细胞和亲本细胞表型差异；另外体外诱导卵巢癌细胞发生EMT，观察对顺铂化疗敏感性的影响，以期探讨EMT与卵巢癌细胞顺铂化疗耐药间的关系，为阐明卵巢癌顺铂耐药提供新的研究思路。

1 材料与方法

1.1细胞及试剂 人卵巢癌细胞株A2780、OVCAR3购自中国科学院上海细胞生物所；新型甲胺化合物(MTS)、顺铂及转化生长因子β(TGF-β)购自美国Sigma公司；RPMI 1640培养基和胎牛血清购自广州英韦创津公司；Transwell小室购自美国Millipore公司；鼠抗人E-cadherin、vimentin、免疫荧光标记二抗和羊抗鼠IgG-HRP二抗购自美国Cell Signaling公司。……