青蒿素对阿尔茨海默病模型细胞的影响及机制

龙惠萍，石胜良，王成志

(1 广西医科大学, 南宁 530031; 2 广西医科大学第二附属医院; 3 广西医科大学第三附属医院)

阿尔茨海默病(AD)是一种渐进性神经退行性疾病，其病理特征主要是老年斑、神经原纤维缠结及神经元缺失[1]。细胞自噬、氧化应激、炎症及细胞凋亡等多种因素共同参与了AD的形成[2]。β淀粉样蛋白(Aβ)过度沉积诱导的氧化应激是AD形成的主要原因之一[3]。此外，氧化应激反应又可促进Aβ的合成[4]。研究表明，清除活性氧(ROS)对于缓解AD的发生发展具有确切的疗效[5]。因此，减少Aβ诱导的氧化应激是AD潜在的一种治疗策略。目前针对AD的药物大多数为缓解性药物，尚无确切的能逆转AD的药物。青蒿素(ART)是一种倍半萜内酯分子，近年研究发现其除具有抗疟疾效用外，ART及其衍生物还具有神经保护作用[6]。目前，关于ART对AD发病机制中Aβ诱导氧化应激的影响尚不明确，相关研究较少。2018年1月～2019年1月，我们观察了ART对AD模型细胞活力、氧化应激、炎症因子及自噬的影响，为ART在AD防治中的应用提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 细胞与主要试剂 BV-2小胶质细胞株由首都医科大学宣武医院馈赠。胎牛血清、DMEM培养基购自 Gibco 公司；青-链霉素双抗购自碧云天公司；ART、 β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)购自Sigma公司；CCK8购自同仁公司；RNA提取试剂盒购自OMEGA；cDNA 逆转录试剂盒和 PCR 试剂盒购自 TAKARA 公司；Cyto-ID细胞自噬检测试剂盒、Hoechst 33342购自ENZO Life Science；MitoSox Red线粒体超氧化物检测试剂盒购自Eugene公司；IL-1β、TNF-α、IL-6 ELISA试剂盒购自武汉华美公司。Aβ1-42用二甲基亚枫(DMSO)溶解，用高压灭菌的双蒸水稀释至100 μmol/L。

1.2 细胞培养 BV-2 细胞在含有10%胎牛血清，1%青-链霉素双抗的 DMEM 高糖培养基中培养，置入37 ℃、5% CO2恒温细胞孵育箱中。……