急性湿疹大鼠皮肤屏障功能变化及机制

葛一漫，胡一梅，马韬，张灵玲，雍江堰，张朝明

(1成都中医药大学附属医院，成都610075；2成都中医药大学)

人体皮肤直接与外界接触，在一定程度上可以阻止外部环境中不利因素的侵害，还可防止体内水分的丢失。皮肤屏障主要指角质层结构相关的屏障，角质层结构主要包含角质细胞及细胞间脂质。任何改变角质层结构蛋白功能、脂质正常代谢的因素都可能会导致皮肤屏障功能异常。本课题组前期研究发现，急性湿疹的发病及病情的转归与皮肤屏障功能是否完好密不可分。但急性湿疹疾病中皮肤屏障的异常究竟是破坏了角质细胞结构，还是脂质结构，或者二者兼有尚需进一步证明。2016年1月～2018年12月，本实验拟通过比较正常大鼠和急性湿疹大鼠皮肤病理改变，探讨急性湿疹大鼠发病与皮肤屏障异常的相关性。

1 材料与方法

1.1 动物、主要试剂与仪器 SD大鼠20只，体质量(200±20)g，由成都达硕动物实验有限公司提供；2，4-二硝基氯苯(DNCB)(成都科龙化工试剂厂)；AF200皮肤表皮水分丧失测定仪(英国BIOX公司)；一抗PAR-2(北京博奥森生物技术有限公司)；二抗及相应试剂盒及阳性片(北京中山金桥生物有限公司)；Image-Pro Plus图像分析系统(Media Cybernetics公司)

1.2 动物分组及模型建立 采用随机数字表法，将20只大鼠按分层随机法分为正常组、模型组各10只。模型组大鼠腹部、右背部剃毛后，于腹部涂5% DNCB 30 μL进行首次致敏，第3、5、7天于右背部涂0.2% DNCB 50 μL进行抗原攻击。第9天观察大鼠造模区皮肤是否有急性湿疹症状，如皮肤上出现红斑、水肿、丘疹、丘疱疹、水疱、糜烂等湿疹样皮损表现，即为造模成功。……