肠通对小鼠便秘的有效性研究

付满玲 庞艳 杨树娟 胡方园 杨升 周玉霞 胡月 刘珉甬

摘要：目的  研究腸通对小鼠便秘的有效性。方法  用复方地芬诺酯灌胃制备小鼠便秘模型100只，用0.9% NS灌胃制备空白组模型20只，分为肠通高剂量组（10 mg/只）、肠通中剂量组（5 mg/只）、肠通低剂量组（2.5 mg/只）、阳性对照组、模型组和空白组共6组，每组20只。肠通高剂量组、中剂量组、低剂量组用肠通与墨汁等体积混合进行灌胃，0.1 ml/只;阳性对照组将杜密克与墨汁等体积混合灌胃，67 mg/只，0.1 ml/只;模型组和空白组用墨汁灌胃，0.1 ml/只。灌胃25 min后，每组脱颈处死10只测定墨汁推进率，取小肠标本做病理检查。每组存留的10只小鼠观察灌胃后首粒排黑便时间、6 h内排黑便粒数、粪便含水量、有无死亡。结果  ①肠通对便秘小鼠墨汁推进率的影响：各组小鼠小肠总长度比较，差异无统计学意义（P>0.05）;空白组墨汁推进长度、墨汁推进率均大于其余各组，肠通高、中、低剂量组均大于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）。②肠通对便秘小鼠排便情况的影响：空白组首粒排便时间短于其余各组，差异有统计学意义（P<0.05）;模型组6 h排便粒数、排便含水量均少于其余各组，差异有统计学意义（P<0.05）。③各组小鼠均未死亡。④病理学：各组小肠绒毛排列整齐，结构完整。结论  肠通能有效治疗小鼠便秘。

关键词：便秘;肠通;杜密克;墨汁;通便

中图分类号：R319                                    文献标识码：A                                 DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.09.024

文章编号：1006-1959（2019）09-0074-04

Abstract：Objective  To study the effectiveness of Changtong on constipation in mice. Methods  A total of 100 mice constipation models were prepared by intragastric administration of compound diphenoxylate. 20 mice in the blank group were prepared by intragastric administration of 0.9% NS. They were divided into high-dose group （10 mg/mouse），Intestinal medium dose group （5 mg/mouse）， intestinal low dose group （2.5 mg/mouse）， positive control group， the model group and the blank group， 20 mice in each group. The high-dose group， the middle-dose group and the low-dose group were intragastrically administered with an equal volume of intestinal and ink， 0.1 ml/mouse; the positive control group was mixed with Dumilk and ink in the same volume， 67 mg/mouse. 0.1 ml/mouse; model group and blank group were intragastrically administered with 0.1 ml/mouse. After 25 minutes of gavage， 10 mice in each group were sacrificed to measure the ink propellation rate， and the small intestine specimens were taken for pathological examination. 10 mice in each group were observed for the first squatting time after gavage， the number of black stools in 6 h， the moisture content of the feces， and the presence or absence of death. Results  ①The effect of Changtong on the ink propelling rate of constipation mice： There was no significant difference in the total length of small intestine between the groups （P>0.05）; the ink propulsion length and ink propulsion rate of the blank group were larger than the other groups， The high， medium and low dose groups were larger than the model group，the difference was statistically significant （P<0.05）.②The effect of Changtong on the defecation of constipation mice： The first defecation time in the blank group was shorter than the other groups， the difference was statistically significant （P<0.05）; The number of defecation and defecation water content in the model group were lower than those in the other groups at 6 h，the difference was statistically significant （P<0.05）.③None of the mice in each group died. ④Pathology： The villi of the small intestines were arranged neatly and the structure was complete. Conclusion  Changtong can effectively treat constipation in mice.

Key words：Constipation;Intestinal pass;Dumilk;Ink;Laxative

老年性便秘是一种起病诱因极其复杂的疾病，涉及面广，表现为一系列生理、心理和精神状态的改变，发生率随年龄增长而增加至15%～30%，各种原因导致的肠传导功能失常或肠内津液不足都可引发便秘，而长期住院患者发病率高达80%以上，易引发脑血管破裂、心梗等并发症，危及生命[1-4]。因此，防治老年性便秘具有十分重要的意义。药食同源食品在国际上的重视程度越来越高[5]，肠通则是依据中医“药食同源”特性，結合现代肠道微生态研究进展，根据老年性便秘特点研制的食品。为了检测肠通的有效性与安全性，本研发团队开展了肠通对小鼠便秘的有效性研究，现报告如下。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1实验对象  昆明小鼠（Kunming mice，KM小鼠），18～22 g，雌雄各半，共120只，由西南医大学实验动物中心提供SCXK（川）2013-17，通过了西南医科大学动物实验伦理审查，遵照动物福利进行实验，饲养温度20～25℃，湿度40%～70%。实验中动物均单笼饲养，正常饮水进食。

1.1.2实验药物  炭粉液[6]（首粒黑便指示剂）：加水400 ml将阿拉伯树胶（迈瑞尔9000-01-5）100 g配成0.25%透明溶液，将活性炭粉（嵩山滤材活性炭厂）50 g加至上述溶液中煮沸3次，冷却后加水至500 ml，于4℃冰箱保存，用前摇匀，并加入等量蒸馏水，制得炭粉液待用（0.01 ml/g）。复方地芬诺酯（康普药业，1109027）混悬液：2片复方地芬诺酯片（2.5 mg/片）研磨成粉，加入2.5 ml水均匀混合。肠通（岷宏）：用0.9%NS以正常成人0.0025 mg/d为标准配置成不同浓度悬液。0.9%NS（四药）。杜密克（荷兰Abbott Biologicals， B.VH20120387）。

1.2方法

1.2.1造模及分组  ①造模：复方地芬诺酯法：小鼠100只禁食16 h后按10 mg/kg一次灌胃。用该模型模拟临床非特异性便秘[7]，即造模后小鼠排便减少或难排便，与临床症状及诊断基本相同。以小鼠出现竖毛、少动、蜷曲、蹲伏、不进食，大便干硬，排便次数减少，粪便颗粒明显变细、变小为成功标志。NS灌胃法：小鼠20只用0.9%NS灌胃（用于空白组的造模）。造模30 min后进行分组。②分组（20只/组）：○a肠通组：高（10 mg/只）、中（5 mg/只）、低（2.5 mg/只）剂量组，相当于人体剂量的5、10、20倍，用肠通与墨汁等体积混合物进行灌胃，0.1 ml/只。○b阳性对照组：杜密克与墨汁等体积混合灌胃，67 mg/只，0.1 ml/只。○c模型组：墨汁灌胃，0.1 ml/只。④空白组：墨汁灌胃，0.1 ml/只。

1.2.2小肠推进实验  灌胃25 min后每组立即脱颈处死小鼠10只，计算墨汁推进率[8]：剪取上自幽门、下至回盲肠部的肠管为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”[7];取小肠标本做病理学检查。墨汁推进率（%）=墨汁推进长度（cm）/小肠总长度（cm）×100%。

1.3观察指标  观察各组的墨汁推进率、首粒排黑便时间、6 h内排黑便粒数、含水量[含水量=（湿重-干重）/湿重×100%]、有无死亡以及病理学。于小鼠幽门下15 cm空肠处剪取2 mm×3 mm肠壁，用4℃ 0.9% NS清洗后置于冷多聚甲醛-戊二醛固定液。

1.4数据处理  采用SPSS 11.0统计软件处理数据，计量资料以（x±s）表示，采用t检验。符合方差分析的数据采用单因素方差分析，非正态的数据采用Kruskal-Wallis H多组秩和检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1肠通对便秘小鼠墨汁推进率的影响  ①小肠总长度：各组小鼠小肠总长度比较，差异无统计学意义（P>0.05）。②墨汁推进长度：空白组墨汁推进长度均大于其余各组，差异具有统计学意义（P<0.05）;空白组墨汁推进长度大于肠通高剂量组，差异有统计学意义（t=5.81，P=0.00）;肠通高、中、低剂量组墨汁推进长度均大于模型组，差异具有统计学意义（t=6.75，8.90，9.08;P<0.05）。③墨汁推进率：空白组墨汁推进率均大于其余各组，差异具有统计学意义（P<0.05）;肠通高中低剂量组墨汁推进率有所上升，与阳性对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）;肠通高、中、低剂量组墨汁推进率均大于模型组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2小鼠排便实验结果  ①首粒排便时间：与空白组比较，肠通高、中、低剂量组，阳性对照组，模型组的首粒排便时间均延长，差异具有统计学意义（t=7.22，7.13，6.66，7.36，9.29;P=0.00）。②6 h排便粒数：模型组6 h排便粒数少于其余各组，差异有统计学意义（P<0.05）。③排便含水量：与模型组比较，肠通高、中、低剂量组，阳性对照组的排便含水量均升高，差异具有统计学意义（t=4.40，5.27，6.19，9.84;P=0.00），见表2。

2.3小鼠死亡情况  各组小鼠均无死亡。

2.4组织病理学检查  各组小肠绒毛排列整齐，结构完整，见图1。

3讨论

便秘以排便困难为主要病症，可引发痔疮、肛裂等并发症，且易诱发老年人心脑血管等慢性疾病的发生发展[9，10]。随着生活水平的改善，便秘在老年人中发病率逐渐增高，其在中医学被称为“大便难”“不更衣”“脾约”“阳结”“阴结”等，病因有饮食不节、年老体弱、情绪失调、气机郁滞等，与胃、肠、肝、肾、脾、肺功能失调相关，而老年性便秘从病因、发病机制及临床症状上讲，属现代医学中的功能性便秘[11]。西医多采用服用西沙必利片、乳果糖口服液、导泻剂等，虽有一定治疗效果，但会引起一定毒副反应，如恶心、呕吐、腹泻、水电解质紊乱等[12，13]。中医多采用中药内服、针灸推拿、敷脐疗法等[14，15]，治疗方法多样，疗效确切，安全无毒副作用，中医药治疗老年性便秘的优势明显，经济适用，标本兼顾，越来越受到重视[16]。

肠通是依据我国《黄帝内经》基本理论组方而成，是在突出饮食调养及预防作用上开创的药物与食物相结合的“药食同源”功能性食品[17]，结合现代肠道微生态研究进展，根据老年性便秘特点研制的食品。肠通系自主研发的食品，已申报国家发明专利，其主要成分由A与B单体组方配成。A具有XOS生理活性，能有效减少老年便秘的发生。分析原因可能是A分子具有多个亲水基团，可与水分子聚集成巨大分子，且粘度高，稳定性好有关。在胃肠道中，A能吸水与水形成粘稠胶状物，软化食物残渣而直接发生通便作用。A是由2～10个单糖分子通过糖苷键连接形成的低度聚合糖，它可有效促进生物体内以双歧杆菌为代表的肠道有益菌群的特异性增殖， 多项双歧杆菌的纯培养研究证实，XOS可被多种双歧杆菌所代谢，产生一系列肠保健功能。B是中药单体，有疗效确切促进肠蠕动作用，二者组合，是一种较好的润肠通便功能性食品，且无副作用。肠通对便秘小鼠墨汁推进长度、墨汁推进率、首粒排便时间、6 h排便粒数、排便含水量的影响差异有统计学意义，与模型组、空白组对照，肠通高中低剂量组能有效治疗便秘小鼠，具有润肠通便的作用。

本研究采用复方地芬诺酯灌胃制备小鼠便秘模型，肠通组与阳性对照组同用墨汁灌胃，以小鼠的墨汁推进率、首次排黑便时间、6 h排便粒数、粪便含水量等指标评价肠通的通便功能。采用墨汁灌胃测定排便时间是动物实验的常用手段，常用于通便药物的疗效评价，对比结果具有可靠性、科学性。本研究的阳性对照组杜密克[18]是临床常用的高渗性泻药，可保留大肠中的水及电解质，增加粪便渗透性，软化粪便帮助排泄，且不为人体吸收，无肠道刺激性，具有实验价值。研究数据显示肠通与阳性对照组比较，高中低剂量组均能达到药物（杜密克）治疗便秘的疗效。杜密克虽在临床常用，但归根结底还是一种药物治疗，而肠通 “药食同源”功能性食品，安全有效，价格低廉。

本研究采用复方地芬诺酯灌胃制备小鼠便秘模型，肠通组（肠通悬液）与阳性对照组（杜密克）同用墨汁灌胃，研究结果证明肠通可对抗复方地芬诺酯引起的肠抑制作用。便秘是消化系统常见病症，影响人群多、涉及范围广，现临床治疗仅局限于“头痛医头，脚痛医脚”，疗效不佳[19]，中医药治疗老年性便秘治疗依从性好、接受度高[20]，肠通是自主研发的新型食品，对于人体健康有重要作用[21]，因此研发出安全有效、服用方便的功能性食品尤为重要。

综上所述，本次研究结果提示肠通能有效治疗小鼠便秘，对防治老年性便秘有重要的意义。

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收稿日期：2019-2-27;修回日期：2019-3-10

编辑/杨倩

基金项目：四川省科技支撑计划（编号：2016FZ0059）

作者简介：付满玲（1995.4-），女，四川泸州人，硕士研究生，主要从事中药化学与中药制剂的研究

通讯作者：刘珉甬（1952.5-），女，四川泸州人，本科，教授，主要从事功能性食品研发