不同造粒方法对造粒藤茶功能性成分浸出率的影响

温晓 魏媛媛 李伟业 于华忠

摘要[目的]探讨藤茶碎末制备颗粒茶的最佳造粒方法。[方法]通过测定总黄酮、二氢杨梅素（DMY）在80、90、100 ℃条件下浸提1、2、3、4、5、15、30、60 min的浸出率和浸出速度，确定藤茶的最佳造粒方法。[结果]沸腾造粒法制备的藤茶颗粒茶在100 ℃下浸提时浸出率和浸出速度均高于80和90 ℃，功能性成分总黄酮浸出率最高（98.5%）。沸腾造粒藤茶总黄酮和DMY浸出率、浸出速度均高于湿法挤压造粒和滚筒造粒。[结论]藤茶碎末造粒制备颗粒茶的最佳造粒方法为沸腾造粒。

关键词藤茶碎末;造粒方法;浸出率

中图分类号F416.82文献标识码A

文章编号0517-6611（2019）03-0166-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.03.052

藤茶又名甜茶、白茶、土家神茶、仙圃藤等，为葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄（Ampelopsis grossedentata）的茎叶。藤茶主要分布于我国湖南、湖北、福建、贵州、云南、广西、广东等地，在湖南、广西等地已有较大规模人工栽培[1]。《中华本草》中记录其凉，味苦，微涩;具有平肝降压、清热利湿、活血通络等功效。作为药用植物资源，藤茶是一种具有广泛开发价值的药用植物[2]。国家卫生计生委2013年发布了《关于批准显齿蛇葡萄叶等3种新食品原料的公告》，显齿蛇葡萄叶被确定为新资源食品[3]。这也为藤茶的开发和利用提供了条件。

藤茶资源丰富，具有降血压血脂[4-5]、抗癌[6]、抗氧化[7]、抗菌消炎[8-9]、保肝醒酒[10-11]等功效，但其开发薄弱，利用单调，主要以传统初加工开发为主。经统计，藤茶茶叶在加工工艺过程中会产生大约30%的碎末，这些碎末具有与藤茶一样的功效成分和理化活性。笔者对这些藤茶碎末进行不同方式造粒，研究其浸出率，进而确定最佳造粒方法。

1材料与方法

1.1试验材料

藤茶碎末，由羅塔坪藤茶种植基地提供，干燥后密封保存于干燥器皿中备用;98%二氢杨梅素（DMY）标准品，购自中国生物制品检定所;三氯化铝、磷酸均为国产分析级。乙腈、甲醇为色谱纯;蒸馏水;羧甲基纤维素钠、高黏性瓜尔胶为国产分析级。

1.2仪器与设备

FA2204B万分之一天平（上海佑科仪器仪表有限公司）、150T粉碎机（永康市铂欧五金制品有限公司）、UV-3900紫外分光光度计、LC-20AT液相色谱仪（岛津）、HH-4数显搅拌水浴锅（金坛市白塔新宝仪器厂）、FL沸腾制粒机（常州市永昌制粒干燥设备有限公司）、Q-230丸药成型机。

1.3藤茶藤茶总黄酮的测定

1.3.1原材料预处理。

将原材料藤茶碎末放入粉碎机粉碎处理，过60目筛。

1.3.2藤茶造粒。

以GB/T 23776—2018茶叶感官评价为指标，通过正交试验确定造粒方法最优方案。

1.3.2.1湿法挤压造粒。

准确称取“1.3.1”中的原材料5 g，放置待用。量取6 mL纯水加入0.4 g高黏性瓜尔胶和羧甲基纤维素钠1∶1复配黏合剂中，搅拌均匀。将原材料和黏合剂混合均匀，通过湿法挤压进行造粒。将造粒后的颗粒茶置于60 ℃烘箱中干燥6 h。

1.3.2.2沸腾造粒。

准确称取“1.3.1”中的原材料5 g，静置待用。量取15 mL纯水加入到0.2 g高黏性瓜尔胶和羧甲基纤维素钠1∶1复配黏合剂中，搅拌均匀。将原材料和黏合剂混合均匀，采用沸腾造粒法进行造粒。将造粒后的颗粒茶置于60 ℃烘箱中干燥6 h。

1.3.2.3滚筒造粒。

准确称取“1.3.1”中的原材料5 g，静置待用。量取7 mL纯水加入到0.4 g高黏性瓜尔胶和羧甲基纤维素钠1∶1复配黏合剂中，搅拌均匀。将原材料和黏合剂混合均匀，采用滚筒造粒法进行造粒。将造粒后的藤茶置于60 ℃烘箱中干燥6 h。

1.3.3样品溶液的制备。

称取造粒藤茶原料2 g左右，分别加入100 mL 80、90、100 ℃蒸馏水，并在80、90、100 ℃水浴中各浸提1、2、3、4、5、15、30、60 min，滤纸抽滤[12]，滤液用纯水定容至100 mL，备用。

1.3.4总黄酮含量的测定。

参考陈雁梅[13]的方法，绘制总黄酮标准曲线，吸取适量“1.3.3”供试品溶液3份，置于25 mL容量瓶中，加入7.5 mL 5%的AlCl3溶液，纯水定容至刻度，放置40 min后，以310 nm为检测波长、340 nm为参比波长，分别测定其吸收度A。

1.4藤茶碎末二氢杨梅素（DMY）含量的测定

1.4.1样品溶液的制备。

同“1.3.3”。

1.4.2液相色谱条件。

色谱柱系Kromasil C18，以乙腈∶0.05%磷酸（18∶82）为流动相，流速为1 mL/min，柱温为27.8 ℃，检测波长为292 nm。

1.4.3对照品溶液的配制。

精密称取干燥至恒重的DMY标准品20.9 mg，用甲醇定容至100 mL，分别移取1.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL对照品溶液置于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，过0.45 μm膜，按照“1.4.2”中条件进行测定。

1.4.4样品溶液的配制。

分别移取10 mL“1.3.3”中的样品溶液置于25 mL容量瓶中，甲醇定容，过0.45 μm膜，按照“1.4.2”中条件进行测定。

1.5浸出率测定

1.5.1总黄酮浸出率的测定。

以100 ℃全浸提法（浸提60 min）测定的总黄酮含量为100%。不同条件下提取物含量与全浸提含量比值为浸出率。

1.5.2DMY浸出率的测定。

以100 ℃全浸提法（浸提60 min）测定的DMY含量计为100%。不同条件下提取物含量与全浸提含量比值为浸出率。

1.6数据统计与分析

所有试验重复3次，试验数据采用EXCEL 2016和DPS统计软件进行二次多项式逐步回归和多线性回归分析。

2结果与分析

2.1冲泡温度与时间对茶汤中总黄酮浸出率的影响

以100 ℃全浸提法（浸提60 min）测定的总黄酮含量计为100%。不同冲泡温度和冲泡时间下总黄酮的浸出率见图1。由图1可以看出，同一冲泡时间下各温度对总黄酮的影响从大到小依次为100、90、80 ℃;同一温度条件下，总黄酮的浸出率随冲泡时间的延长而增高;同时控制温度和冲泡时间2个变量，相同条件下，沸腾造粒藤茶浸出率均高于湿法挤压造粒和滚筒造粒;当冲泡时间超过30 min时，藤茶总黄酮浸出率逐渐趋于平衡。究其原因，可能有以下方面：首先，可能与黏合剂的性质有关。瓜尔胶直链上没有非极性基团，大部分伯羟基和仲羟基都处于外侧，而且半乳糖支链并没有遮住活性的醇羟基。因而，瓜尔胶具有最大的氢键结合面积，当与纤维结合时形成的氢键结合距离短，结合力大，与羧甲基纤维素钠复配后增加其黏合性。由于不同造粒方法原辅料配比不同，其中沸腾造粒藤茶所用黏合剂比例最小，在一定程度上对藤茶总黄酮浸出率有影响。其次，由于加工工艺的不同，不同的造粒方法对制备颗粒茶受力不同，其中湿法挤压造粒、滚筒造粒对藤茶碎末施加更大的力度，颗粒茶更加紧致，总黄酮不易浸出。最后，这与造粒藤茶的外形有关，沸腾造粒及滚筒造粒藤茶均为圆球形，在冲泡条件下有更大的接触面积，而湿法挤压造粒藤茶为圆柱体，冲泡时接触面积小，进而影响浸出率。

用每分钟总黄酮浸出率的增加量来表示总黃酮的浸出速率，湿法挤压造粒藤茶、沸腾造粒藤茶、滚筒造粒藤茶在各温度条件下浸提时，均表现为0～1 min内总黄酮的浸提速率最大，在30～60 min内降至最小值，在相同的时间段内温度越高，总黄酮浸出率越大。

以冲泡时间为横坐标，以总黄酮浸出率为纵坐标，分别绘制不同造粒藤茶不同温度条件下的浸出物收率曲线，并对曲线进行拟合，得到总黄酮浸出率为指标的拟合曲线方程，其中C为总黄酮浸出率，t为冲泡时间。分别令C为50%和100%，根据拟合曲线方程计算所需的浸提时间t1/2（半数浸提所需的时间）和t1（全浸提所需的时间）。由表1可知，在100 ℃冲泡条件下，沸腾造粒藤茶在7.40 min时，其浸出率已达到50%，湿法挤压造粒藤茶、滚筒造粒藤茶分别在109.90和60.30 min时总黄酮浸出率达到50%。

经过统计分析，对冲泡温度（X1）、冲泡时间（X2）与湿法挤压造粒藤茶中总黄酮浸出浓度（Y）进行二次多项式逐步回归分析，回归方程为Y=113.448 3+0.536 1X1-2.755 1X2-0.019 3X12+0.016 3X22+0.012 6X1X2（R2=0.967 3）。冲泡温度、冲泡时间与沸腾造粒藤茶中总黄酮浸出浓度（Y）的回归方程为Y=324.297 4+0.929 2X1-7.598 3X2-0.042 2X12+0.044 3X22+0.031 0X1X2（R2=0.947 7）。冲泡温度、冲泡时间与滚筒造粒藤茶中总黄酮浸出浓度（Y）的回归方程为Y=55.939 5-0.535 4X1-1.408 2X2-0.018 1X12+0.008 7X22+0.023 8X1X2（R2=0.943 8）。

2.2冲泡温度与时间对茶汤中DMY浸出率的影响

以100 ℃全浸提法（浸提60 min）测定的DMY含量计为100%。不同冲泡温度和冲泡时间条件下DMY的浸出率见图2。从图2可以看出，在相同冲泡时间下各温度对DMY浸出率的影响从大到小依次为100、90、80 ℃;在同一温度条件下，DMY浸出率随冲泡时间的延长而增高;同时控制温度和冲泡时间2个变量，相同条件下沸腾造粒藤茶DMY浸出率均高于湿法挤压造粒藤茶和滚筒造粒藤茶;当冲泡时间超过30 min时，DMY浸出率逐渐趋于平衡。究其原因，可能有以下方面：首先，可能与黏合剂的性质有关，由于不同造粒方法原辅料配比不同，其中沸腾造粒藤茶所用黏合剂比例最小，在一定程度上对藤茶DMY浸出率有影响。其次，由于加工工艺的不同，不同的造粒方法对制备颗粒茶受力不同，其中湿法挤压造粒、滚筒造粒对藤茶碎末施加更大的力度，颗粒茶更加紧致，DMY不易浸出。最后，这可能与造粒藤茶的外型有关，沸腾造粒及滚筒造粒藤茶均为圆球形，在冲泡条件下有更大的接触面积，而湿法挤压造粒藤茶为圆柱体，冲泡时接触面积小，进而影响浸出率。

用每分钟DMY浸出率的增加量来表示DMY的浸出速率，湿法挤压造粒藤茶、沸腾造粒藤茶、滚筒造粒藤茶在各温度条件下浸提时，均表现为0～1 min内DMY的浸提速率最大，在30～60 min内降至最小，在相同的时间段内温度越高，DMY浸出率就越大。

3结论

以总黄酮和DMY浸出率、浸出速度为考察指标，结果表明100 ℃浸提时藤茶颗粒茶的浸出率和浸出速度均高于90、80 ℃;同时控制冲泡温度、冲泡时间2个条件，沸腾造粒藤茶总黄酮和DMY浸出率、浸出速度均高于湿法挤压造粒和滚筒造粒。因此，藤茶碎末造粒制备颗粒茶的最佳造粒方法为沸腾造粒。

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