氧化石墨烯基质毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器的性能研究

刘 佳，董 旭，郭 华，王 嫚，申刚义

(中央民族大学 药学院,民族医药教育部重点实验室(中央民族大学)，北京 100081)

固定化酶微反应器作为一种微型生化反应工具，具有样品用量少、催化效率高、可重复利用、易功能化组装等优势，在蛋白质酶解、生物传感器、抑制剂筛选等领域得到了广泛研究和应用[1-3]。而将固定化酶微反应器和高效分离技术在线联用，可实现酶解-分离-鉴定一体化平台操作，显著提速研究周期。目前，国内外众多学者对固定化酶微反应器在线高效分离技术进行了大量研究[4-7]。如Zhang等将胰蛋白酶微反应器与μPRLC-ESI-MS/MS联用，构建了一个集在线蛋白变性、还原、酶解、分离、检测于一体的蛋白质分析平台[4]。相对于其他分离技术，以毛细管为反应及分离通道的毛细管电泳酶微反应器因制作简便、分离效率高、易于联用而优势明显。研究者将固定化酶微反应器与毛细管电泳在线耦合，开展了从中药材中筛选酶抑制剂的研究[7-8]。本课题组也基于毛细管电泳酶微反应器，测定了吉非替尼对人表皮生长因子受体的抑制率[8]。毛细管电泳酶微反应器主要由酶微反应器和毛细管分离通道两部分构成。不同的固酶基质对酶微反应器的性能有很大影响。而不同的毛细管电泳分离模式也直接影响后续样品的分离效率。因此开发新型固酶基质和电泳分离介质对于提高毛细管电泳酶微反应器性能至关重要。

近年来，纳米材料作为固酶基质和分离介质逐渐受到研究者的青睐[9-10]，其中石墨烯(Graphene)作为新型纳米材料[11-12]广受关注。……