猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病的效果分析

张保云

（甘肃省天水市动物疫病预防控制中心，741000）

猪肉是我国主要肉类食物，保障猪肉供应与食品安全对于民生有着非常重要的意义。猪蓝耳病（普通型）是高发病率、高死亡率的猪瘟病，传染性较强，给猪养殖户带来巨大经济损失，严重影响猪肉市场的供应与安全。猪蓝耳病（普通型）主要表现为高死亡率（仔猪）、呼吸道疾病（育成猪）、繁殖障碍（母猪）三大症状。猪蓝耳病（普通型）病猪往往同时感染多种病菌，如伪狂犬病病毒、混合猪瘟等、猪流感病毒，容易出现继发性感染。为此，本文将详细分析猪蓝耳病（普通型）使用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗的效果。

1 研究过程

1.1 研究资料

选择** 某地区猪蓝耳病（普通型）疑似病猪作为研究对象，取全血27份（1例3份，共计9头）。根据孙永亮等人的方法设计异性引物，确定上游与下游引物序列、经典毒株与PRRSV变异株预期扩增产物长度，各项数据分别为：5＇-TGGGC-GACAATGTCCC-3＇、5＇-TGGGC-GCTGAGTATTTTGGGCG-3＇、418bp、508bp。同时准备RNA提取试剂盒、RT-PCR 试剂、琼脂糖、低分子质量蛋白质Marker[1]。

1.2 研究方法

RNA 提取方法：采集疑似病猪全血后，迅速进行全血分离，并按照试剂盒要求提取病毒总RNA。进行反转录反应时，此次研究人员应该按照相关使用说明书，生成反转录产物，并将其低温保存（-20℃）或直接应用于PCR 反应模板之中。

PCR 反应方法：（1）准备物质：10μL 反转录产物、10μL 5*PCR Buffer、0.5μL 上游与下游引物、0.25μL（5U/μL）TaKaRa Ex Taq HS、50μL 灭菌双蒸水（补充总体积）。（2）反应条件：调解温度至94℃变性（5min）—PCR 循环—94℃（1min）—57℃（1min）—72℃（1min）。（3）待其循环35 次后，调节温度至72℃（10min）。（4）反应结束后，将产物低温保存（4℃）。

电泳检测（PCR 产物）：（1）准备物质：琼脂糖凝胶（1%）、PCR 产物。……