赤霉素G A3对贯叶连翘试管苗玻璃化现象的影响

贯叶连翘为藤黄科金丝桃属植物，多年生草本，又名贯叶金丝桃。贯叶连翘在药用和观赏方面的应用已引起了人们的广泛关注，但其野生资源种群数量少，种子数量有限，近年来作为药源，人为采挖较为严重，为有效保护野生资源，大力开展贯叶连翘的繁育工作势在必行，利用组织培养进行快速繁殖，是促进贯叶连翘良种繁育的有效途径。但贯叶连翘初代诱导过程中玻璃化问题较为严重，为解决这一问题，项目组在改善其它培养条件的基础上着重研究了不同浓度的赤霉素(GA3)对贯叶连翘试管苗分化和发育的影响，以期获得玻璃化现象的逆转。

一、材料与方法

（一）材料

4月中下旬在甘肃省小陇山林区选择无病虫害、生长正常的贯叶连翘顶部嫩梢先端2～3厘米的茎段作为繁殖材料。

（二）方法

1.赤霉素 (GA3)母液的配制 称取赤霉素GA3 0.1克，溶于1摩尔每升热的氢氧化钠溶液中，待完全溶解后转移至容量瓶中，加水定容至100毫升，即得浓度为1毫克每毫升的母液。按实验要求每次吸取（0.1，0.2，0.4，0.5，0.8，1.0）毫升母液于 1 升 MS 培养基中，即可配成含（0.1，0.2，0.4，0.5，0.8，1.0）毫克每升赤霉素GA3的MS固体培养基。

2.接种 试验材料在自来水下将其表面灰尘冲洗干净，在无菌条件下，用75%酒精浸泡30秒，无菌水冲洗3次。在含有0.1%的吐温-80的0.1%HgCl2溶液中灭菌5分钟，灭菌过程中要不时摇动，最后用无菌水冲洗4～5次，吸干水分。用剪刀剪出1.5厘米长茎段（含1～2节间）接种到诱导培养基中进行初代培养。

3.试验设计 初代培养基中加入2，4-D（2.0毫克每升），待愈伤组织形成后，小心切去带有生长点的愈伤组织，以MS为基本培养基，进行继代增殖，诱导芽萌发和促进芽的生长。……