二甲双胍对人绒癌JAR细胞上皮-间质转化和侵袭迁移能力的影响

柳光芬，姚春艳

(1.武警重庆市消防总队医院检验科，重庆 401120；2.陆军军医军医大学第一附属医院输血科，重庆 400038)

人胎盘绒毛癌简称绒癌，由滋养层细胞癌变而来，具有高度的增殖和侵袭能力的妇科恶性肿瘤[1]。在前期研究中发现，使用40 mmol/L二甲双胍可以通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达，促进绒癌细胞凋亡[2]。既往研究表明，AMPK/mTOR信号通路也参与调控了肿瘤细胞的上皮间质转化过程(EMT)，而EMT是导致上皮来源的肿瘤细胞向身体其他器官转移的重要原因，抑制EMT能够显著降低肿瘤细胞的转移能力，提高患者的远期生存率[3-6]。人绒癌为滋养层来源的肿瘤，具有高度的侵袭性，因此如何有效抑制其转移过程是绒癌患者治疗的关键点。本研究以人绒癌细胞JAR为实验对象，旨在探讨二甲双胍对绒癌细胞侵袭和迁移能力的影响，并明确EMT通路中上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)等蛋白的变化趋势和效应方式，为二甲双胍治疗绒癌并抑制其转移提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 人胎盘绒毛癌细胞系JAR购置于中国科学院细胞库。胎牛血清(FBS)购于以色列BI公司；1640培养基购于美国Gibco公司；AMPK、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、E-cadherin、 N-cadherin、 Vimentin等蛋白抗体购于美国abcam公司，β-肌动蛋白购于中杉金桥公司。FlouroBlok cell culture transwell小室购于美国Corning公司；Matrigel胶购于美国BD公司。蛋白提取试剂盒及BCA蛋白浓度测定试剂盒购于碧云天公司。荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪CFX96购于美国Bio-Rad公司；倒置相差显微镜TS-100F购于日本Nikon公司；……