尿液中肌氨酸、PCA3mRNA在前列腺癌早期诊断中的应用

王乾　孙宾　李殷南　沈俭

摘要：目的  探讨尿液中肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA在前列腺癌早期临床诊断中的应用。方法  收集2016年9月～2017年12月在我院收治的前列腺增生患者62例以及前列腺癌患者62例（病理确诊）作为研究对象，前列腺癌患者为研究组，前列腺增生患者为对照组。以两组患者进行前列腺按摩后的初始尿液为标本，采用实时荧光定量对肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA进行检测，比较两组患者肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA的差异并统计两组患者的诊断准确度。结果  研究组患者诊断准确度高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）;研究组患者尿肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA水平分别为（13.51±2.54）ng/ml、（6.09±0.56）ng/ml、（0.53±0.07）μmol/L，高于对照组的（7.60±0.27）ng/ml、（2.03±0.21）ng/ml、（0.36±0.04）μmol/L，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论  早期联合监测尿液中的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平，可以提高前列腺癌的监测有效率，为患者提供更为便利的诊断手段。

关键词：肌氨酸;PCA3mRNA;前列腺癌;早期诊断

中图分类号：R737.25                                 文献标识码：A                                DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.14.059

文章编号：1006-1959（2019）14-0175-03

Abstract：Objective  To investigate the application of sarcosine， PCA3mRNA and serum PSA in the early diagnosis of prostate cancer. Methods  A total of 62 patients with benign prostatic hyperplasia and 62 patients with prostate cancer （pathological diagnosis） were enrolled in our hospital from September 2016 to December 2017. The patients with prostate cancer were the study group and the patients with benign prostatic hyperplasia were the control group. The initial urine of the two groups of patients after prostate massage was used as the specimen. Real-time fluorescence quantification was used to detect sarcosine， PCA3mRNA and serum PSA. The differences of serum PSA between serum and PCA3mRNA were compared and the diagnostic accuracy of the two groups were statistically analyzed.Results  The diagnostic accuracy of the study group was higher than that of the control group，the difference was statistically significant （P<0.05）. The urinary creatinine， PCA3mRNA and serum PSA levels in the study group were （13.51±2.54） ng/ml， （6.09± 0.56） ng/ml， （0.53±0.07） μmol/L， higher than the control group （7.60±0.27） ng/ml， （2.03±0.21） ng/ml， （0.36±0.04） μmol/L，the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion  Early monitoring of urinary creatinine， PCA3mRNA and serum PSA levels in urine can improve the efficiency of prostate cancer monitoring and provide a more convenient diagnostic tool for patients.

Key words：SarcoEsine;PCA3mRNA;Prostate cancer;Early diagnosis

目前腫瘤性疾病已成为社会日益关注的问题，因肿瘤带来的社会问题日益突出，我国每年大概有2500万肿瘤患者，美国前列腺癌的患者每年超过了100万人。统计显示前列腺癌患者的年龄化正逐渐降低，患者的人数不断增加，据预测，10年后我国前列腺癌发病率在男性恶性肿瘤中的排行将晋升至前3位。目前临床上最常用的前列腺癌肿瘤标志物是血清前列腺特异抗原（PSA），尽管血清PSA检测可以发现早期前列腺癌，但该方法特异度不高，特别是PSA水平处于4～10 ng/ml这个检测灰区的患者，活检阳性率仅有20.4%[1]。有报道通过肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA等特异性检测方法对前列腺癌进行诊断，结果显示其具有无创、精确度高等多种优势，成为了一种新起的检测方法[2]。为此，本研究旨在观察尿液中肌氨酸、PCA3mRNA、血清PSA水平在前列腺癌早期临床诊断中的应用价值，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料  收集2016年5月～2017年7月上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院泌尿外科收治的前列腺增生患者62例以及前列腺癌患者62例，前列腺癌患者设为研究组，前列腺增生患者为对照组。研究组年龄36～53岁，平均年龄（45.27±8.41）岁。对照组年龄35～55岁，平均年龄（46.53±9.56）岁。本研究经过医院伦理委员会批准，患者均知情同意本研究并签署知情同意书。两组年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2方法  对两组患者分别进行前列腺按摩后收集初始尿液标本20～30 ml，放入冰水中冷却，离心10 min，分离上清液，将尿液残渣置于冷冻管中，-70℃保存，取离心后残渣，检测肌氨酸，采用同位素稀释液相色谱法（LC/MS）对肌氨酸含量进行检测[4]。按Takara法对总RNA进行提取，采用微量分光光度计对RNA的浓度与纯度进行测定，对离心后的尿沉渣中PCA含量进行测定，常规检测两组患者血清PSA水平。

1.3观察指标  比较两组患者诊断的准确度，尿液中肌氨酸含量、PCA3mRNA含量及血清PSA水平。

1.4統计学方法  本次实验数据使用SPSS 13.0统计学软件进行分析，计数资料采用（n）表示，行？字2检验，计量资料采用（x±s）表示，行t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组诊断准确度比较  研究组患者治疗准确度高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2两组肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平比较  研究组患者的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平均高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05），见表2。

3讨论

随着人民生活水平的提高、生活节奏的逐渐增快，前列腺癌发病率近年来呈现上升的趋势，目前已成为常见的泌尿科外科疾病，严重威胁患者的身心健康及生命[5]。提高早期前列腺的诊断准确性，一直是临床上亟待解决的问题。前列腺癌早期无明显症状，但随着肿瘤的发展会出现急性精囊炎、输精管炎、性功能障碍等多种并发症[6]。本研究以肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸水平，不受丙氨酸的干扰，可有效解决其他检测方法对肌氨酸检测结果的影响。研究显示，前列腺癌患者尿肌肌氨酸的检测容易受到多种外在因素的影响，少部分前列腺患者的肌氨酸含量仅在正常范围内产生波动，肌氨酸在能量代谢上具有重要的作用，肌氨酸的含量与前列腺癌临床分期、区域性淋巴结转移成正相关，与人类寿命成负相关[7，8]。

研究显示，PCA3属于前列腺癌的特异性标记产物，PCA3在正常前列腺细胞中表达率低，会在前列腺癌细胞中出现较高程度的表达，在其他组织细胞、癌细胞中均不会被表达，因此PCA3被认为是检测前列腺癌的特异性基因，这为前列腺癌的诊断提供了新的方法，具有较高的临床价值[9]。在患者尿液中，对PCA3的检测可以采用转录介质的扩增检测法（TMATM），在有逆转录酶与RNA聚合酶的和恒温环境下，对RNA或DNA分子进行扩增，利用TMATM测定男性尿液中的PCA3评分，PCA3的评分标准化数值为两种mRNA的比值，PCA3mRNA与PSA mRNA含量的测定采用含有两种特殊分析成分的试剂，通过对纯化的mRNA进行捕捉，将捕捉到的mRNA与包被有把特异性寡核苷酸和转录介质扩增的RNA序列的磁性粒子杂交，利用标记有吖啶酯染料的共价键做探针特异性检测扩增产物，再用标准光度计定量检测[8]。PCA3在前列腺癌的早期诊断、治疗等环节都具有潜在的应用价值，且具有检测方便、无创等优势，在临床上具有广阔的发展空间。但PCA3检测对实验的条件、试验环境要求较高，目前仍然存在一定的难度[10]。

前列腺癌属于异质性疾病，需要经过多项指标共同检测，随着分子生物学的快速发展，mRNA也被运用在检测当中，这提高了对前列腺癌早期检测的准确性[10]。本研究中，研究组患者检测准确度高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05），同时研究组患者的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平均高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05），说明联合检测肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA可有效提高前列腺癌的检出率，但本研究存在样本量小、研究方向局限等不足。

综上所述，对患者前列腺的尿液进行监测分析，联合检测肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA三个指标，可以提高监测的准确度，为患者提供更为便利的诊断手段，有助于早期前列腺癌的临床诊断。

参考文献：

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[7]梅傲冰，张峻豪，贾本忠，等.前列腺癌中EPCA-2、PSA分子的表达及相关性[J].广东医学，2017，38（17）：2658-2661.

[8]章绪辉，梁文，全显跃，等.多模态MRI技术对早期前列腺癌的应用研究[J].中国临床医学影像杂志，2017，28（2）：116-119.

[9]马宇坤.PCA3检测在PSA灰区对前列腺癌诊断及病理分级的价值[D].山西医科大学，2017.

[10]马悦，陈弋生.前列腺癌精准诊断的新进展[J].中华男科学杂志，2016，22（11）：1030-1033.

收稿日期：2019-3-5;修回日期：2019-3-19

编辑/钱洪飞