Cathepsin L与线粒体自噬

摘要：氧化应激伴随的膜电位的下降引起胞浆内Ca浓度（[Ca]）的上升。胞浆Ca水平的改变导致线粒体-核应激信号的出现。在线粒体应激状态下，线粒体DNA（mtDNA）缺失的细胞中胞浆内Ca的浓度和Cathepsin L的水平都增高，提示两者可能存在相关性。目前，将通过细胞自噬降解线粒体的途径称为线粒体自噬（mitophagy）。DJ-1、PINK1和Parkin 等，在线粒体自噬中起关键的作用。一些研究已经表明Parkin、DJ-1等自噬蛋白的缺失会导致胞浆内Ca水平的增加。本文就Cathepsin L通过Ca与线粒体自噬的联系做简要的探讨。

关键词： Cathepsin L;线粒体自噬;Ca;氧化应激

【中图分类号】R-0    【文献标识码】A    【文章编号】2107-2306（2019）06-199-01

1.PD与氧化应激

氧化应激会引起一系列神经退行性疾病，如帕金森病（Parkinson’s disease，PD）。有关研究发现，线粒体中的E3泛素连接酶Parkin，蛋白激酶PINK1 和 DJ-1等蛋白与PD相关。这些蛋白通过线粒体自噬来调节自身浓度，从而保持线粒体的稳定。线粒体除了可以产生ATP，还可以调控钙稳态和细胞凋亡。氧化应激伴随的膜电位的下降引起胞浆内Ca浓度（[Ca_] ）的上升。胞浆Ca水平的改变导致线粒体-核应激信号的出现。有关实验证明线粒体复合体Ⅰ活性抑制剂鱼藤酮（rotenone）会导致线粒体功能障碍和泛素蛋白酶系统障碍，它通过抑制蛋白酶体活动和增加氧化蛋白来发挥神经毒性作用。鱼藤酮还会导致线粒体形态和动力学的改变。此外，鱼藤酮通过线粒体氧化应激途径诱导多巴胺能神经元凋亡，诱发PD。Cathepsin L是重要的溶酶体半胱氨酸蛋白酶之一，负责降解错误折叠蛋白质和产生基本肽激素来维持细胞内稳态。溶酶体的溶解与坏死有关，有一部分更具选择性的溶酶体膜穿孔后通过释放Cathepsin L促进凋亡。所以，Cathepsin L可能参与了PD的进程。

2. Ca在线粒体应激时的變化

已有实验表明，胞浆Ca水平的改变导致了线粒体-核应激信号的出现，这可能是由于ATP和Ca的流出减少。RyR受体是钙释放通道，受咖啡因调控;IP3-1是闸门Ca通道，实验结果显示氧化应激伴随的膜电位的下降引起胞浆内[Ca_]的上升，而RyR2和IP3-1的水平上调，进一步证实了钙离子的外流。已有相关实验证据显示在线粒体应激状态下，线粒体DNA（mtDNA）缺失的细胞中胞浆内Ca的浓度和Cathepsin L的水平都增高，提示两者可能存在相关性。

3.组织蛋白酶L与Ca

近年的实验结果表明具Ca特性的PKC的作用是通过结合到cathpsin L启动子上的Egr-1介导的。Western blot分析表明经TCDD（一种环境毒素、致癌物质，能诱导线粒体障碍和应激信号）处理的C2C12细胞的Ca通道受体蛋白RyR1和cathpsin L水平上调，这两种蛋白是常用的应激信号标志。它们的激活是应激诱导的细胞变化的标志，这是因为cathpsin L代表着肿瘤侵袭，RyR1代表着钙稳态的调节。

4.线粒体自噬与自噬相关蛋白

线粒体自噬是Lemasters在2005年首次提出的，主要是指在ROS、营养缺乏、细胞衰老等刺激下，细胞内的线粒体发生去极化损伤，损伤的线粒体被特异性包裹进自噬体中，并与溶酶体（ lysosome，酵母中为液泡，vacuole） 融合，从而完成损伤线粒体的降解，维持细胞内环境的稳定。DJ-1、哺乳细胞线粒体外膜蛋白PINK1和胞质的Parkin 等，在线粒体自噬中起关键的作用。

有文章表明DJ-1的过表达增强鱼藤酮诱导的自噬标记物：beclin-1和LC3II的表达。穿透式电子显微镜和共聚焦实验显示DJ-1增加了自噬的超微结构。DJ-1减轻鱼藤酮诱导的MN9D细胞损伤，在鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞死亡的进程中增加自噬。在线粒体解偶联剂处理达1天之久的培养细胞中，Parkin可以介导线粒体通过自噬而被选择性清除。上述实验证据提示，Parkin可以通过选择性清除受损的线粒体而保护细胞器的质量。

5.自噬相关蛋白与Ca

Parkin是维持Ca稳态的重要因子，它的缺乏导致了PLC依赖性的胞浆内Ca水平的增加而使细胞更易受神经毒素的侵害。最近有实验研究DJ-1敲除的小鼠骨骼肌细胞中DJ-1调节Ca稳态的作用，结果发现DJ-1的缺失导致静息胞浆内Ca水平大幅度的增加，肌质网响应电刺激而减少Ca的释放。结合前文所述关于Cathepsin L和Ca的关系，笔者设想是否可以通过抑制Cathepsin L而减少胞浆内Ca水平，从而增加Parkin、DJ-1等自噬蛋白的水平来调控线粒体自噬。

6.结论

受损的线粒体可通过线粒体自噬被清除以保证细胞内线粒体的质量，维持细胞稳态。线粒体自噬受各种调控分子的精细调节，包括DJ-1、PINK1和Parkin 等自噬蛋白，而Cathepsin L和自噬蛋白之间通过Ca加以联系。线粒体自噬的异常与神经退行性疾病如PD等密切相关。但是，还需要更多的细节和量化的研究来探究Cathepsin L在线粒体自噬中的作用。随着对线粒体自噬研究的深入，可能为PD等神经退行性疾病提供新的治疗靶点。

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作者簡介：

徐舒青，女，硕士，药师，研究方向：临床药学。