食品中水溶性维生素HPLC检测研究综述

周 津　罗格莲　王代芳　何文胜

摘 要：维生素是机体维持正常生活必需的一类营养素，摄入不足或过量均可导致机体运动功能障碍，分析和评价食品中的维生素含量将对指导人群科学摄入维生素具有重要参考价值。高效液相色谱法（HPLC）是目前测定维生素最普遍的方法，具有应用范围广、灵敏度高、样品前处理简单、同时分析多种维生素的优点。本文对近年来国内食品中水溶性维生素的HPLC检测技术进行了综述，以期为相关工作提供参考。

关键词：水溶性维生素;检测技术;食品

中图分类号：O657.72 文献标识码：A 文章编号：1003-5168（2019）35-0134-03

Review of HPLC Detection of Water-soluble Vitamins in Food

ZHOU Jin LUO Gelian WANG Daifang HE Wensheng

（Fujian Vocational College of Bio-engineering，Fuzhou Fujian 350002）

Abstract： Vitamin is the body to maintain a normal life necessary for a class of nutrients， inadequate intake or excessive can lead to body movement dysfunction， analysis and evaluation of vitamin content in food will guide the scientific intake of vitamins have an important reference value. High performance liquid chromatography （HPLC） is the most commonly used method for the determination of vitamins， which has the advantages of wide application range， high sensitivity， simple sample preparation and simple analysis of multiple vitamins. This paper reviewed the HPLC detection technology of water-soluble vitamins in domestic food in recent years， with a view to providing reference for related work.

Keywords： water-soluble vitamin;detection technology;food

維生素是维持身体健康所必需的一类有机物，在物质代谢中起重要作用。由于人体不能合成维生素或合成量很少，人们只能从食品中摄取维生素。作为营养强化剂的一种[1]，它常被添加到各类食品中以增加营养价值。维生素摄入不足会导致人体代谢紊乱，以致发生维生素缺乏症;摄入过量会导致机体运动功能障碍。因此，分析和评价食品中的维生素含量将对指导人群科学摄入维生素具有重要参考价值。

维生素的种类很多，化学结构各异，通常，其根据溶解性可以分为脂溶性（A、D、K、E等）和水溶性（B族维生素和Vc）两大类。依据目前我国国家标准，维生素分析方法有微生物法、荧光分光光度法和高效液相色谱法[2-11]，如表1所示。方法较单一，一种方法只能检测一种或几种维生素，而当前复合维生素强化食品众多，对其逐一检测较为烦琐，所以急需开发出一种准确可靠的可以同时测定多种维生素的方法。接下来，本文将对HPLC法检测水溶性维生素的方法进行概述，以供研究参考。

表1 水溶性维生素在食品中的使用量和国标中的检测方法

高效液相色谱法 B5 泛酸、泛酸钙 1.1～80mg/kg 微生物法、高效液相色谱法 B6 吡哆胺、吡哆醛、吡哆醇 0.4～25mg/kg 高效液相色谱法;微生物法 B7 生物素 38～76μg/kg 微生物法 B9 叶酸 50～8 200μg/kg 微生物法 B12 钴胺素 0.6～70μg/kg 高效液相色谱法 Vc 抗坏血酸 50～13 000mg/kg 荧光分光光度法 ]

1 维生素HPLC检测技术

HPLC法是目前测定维生素最普遍的方法，具有应用范围广、灵敏度高、检测成本低及分析效率高的特点。需要指出的是，水溶性维生素的同时检出方法受到提取方法、色谱条件和检测等因素影响较大，如下所述。

1.1 提取方法

提取方法能够影响HPLC法检测的灵敏度和准确度。由于水溶性维生素极性较大，所以可以采用水或者其他极性较大的试剂同时提取多种水溶性维生素。超声处理属于物理前处理方法，在高频声波作用下，在液体中可强化传质、空气以及发热等多种效应，不仅有助于样品分散，更有助于样品中的水溶性维生素进入提取液。目前，超声处理的方法已经广泛应用于药物检测，并列入《中国药典》中作为VC、VB1以及VB2的前处理方法[12]。

此外，由于维生素在强光的照射下会分解，提取时应尽可能避光。将储备液放置于冰箱中，有助于防止其降解。

1.2 色谱条件

目前报道的水溶性维生素液相色谱分析方法有3种：化学键合相色谱、离子交换色谱和亲水作用色谱。其中，化学键合相色谱是较为常见的方法，多采用C18键合固定相色谱分析。这类方法常选择有机试剂（如甲醇、乙腈等）和缓冲剂（如乙酸、磷酸二氢钾等）为流动相，梯度洗脱，其重复性好。而离子交换色谱分析水溶性维生素的关键在于调节流动相pH，存在一定难度，该方法并不普及。

1.3 检测器

根据水溶性维生素的结构特征，目前，液相色谱采用的检测器主要包括紫外检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器和质谱检测器。由于多种水溶性维生素具有生色团，因此紫外检测器适宜处理大部分水溶性维生素。紫外检测器分析成本低，操作简单，是目前应用最广泛的检测器。采用二极管阵列检测器，还可获得色譜峰的紫外-可见光谱，因此可通过色谱峰保留时间和光谱图实现双参数定性，使结果更可靠，避免假阳性。

2 HPLC同时检测多种水溶性维生素

随着国家对食品尤其是特殊膳食中营养成分的监管不断加强，数据的准确性要求不断提高，监测范围及样本量扩大，建立一套准确可靠的多种维生素同时分析的方法，是维生素分析领域的研究重点，高通量、多组分同时测定是维生素分析领域的发展趋势。近年来，科研人员使用HPLC法进行了一些研究[13-20]，如表2所示。

3 结论

相较于传统的微生物法、分光光度法，HPLC法在检测单一或多种水溶性维生素时更加快捷、灵敏、准确，国内外食品药品检测标准都倾向于选择HPLC法。除了涉及单一水溶性维生素的检出，近年来联用检测方法也不断涌现，建立准确、快速的水溶性维生素联用检测技术，加快制定多种维生素同时检测的国家标准，不仅有助于评价相关食品保健品的营养指标，也与日益发展的食品药品加工技术相配套，为科学、合理地使用维生素制品提供参考。

参考文献：

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