神经母细胞瘤抑瘤蛋白1在肺动脉高压大鼠中的表达变化

孟刘坤，滕 晓，袁 雯，孟 健，李 君，刘晓艳

(1.中国医学科学院 北京协和医学院 国家心血管病中心阜外医院 心血管疾病国家重点实验室，北京 100037；2. 首都医科大学附属北京朝阳医院医学研究中心，北京 100020)

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension，PAH)是一种由异源性疾病以不同发病机制引起的，以肺小动脉进行性重构和肺血管阻力持续增加为特征的临床综合征[1]，具有潜在致死性，是继冠脉综合征、高血压之后最常见的心血管病综合征。研究发现，肺动脉细胞组份重获增殖潜能导致的肺血管持续性重构是PAH的主要病理改变，表现为无肌层肺小动脉肌化，肌性肺动脉中膜肌层增厚，特征性的肺小动脉新生内膜和丛状病变的形成[2]。

先前的研究发现，神经母细胞瘤抑瘤蛋白1(neuroblastoma suppression of tumorigenicity 1，NBL1)在正常肺组织中表达水平最高，而其在肺组织发育及病理状态下的作用至今未知[3-5]。肿瘤方面的研究发现，NBL1对肿瘤细胞的增殖具有重要的调节作用[6-9]，但NBL1对肺动脉细胞的影响至今未知。因此，我们推测NBL1或参与了PAH的肺血管重构。本实验拟研究野百合碱(monocrotaline，MCT)诱导的PAH大鼠肺组织和血浆中NBL1的水平及变化趋势，为探讨其在肺血管重构中的作用及作为PAH潜在的生物标志物奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验动物 SD大鼠40只，♂，体质量(200±10)g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2012-0001，均在中国医学科学院阜外医院实验动物中心饲养。

1.1.2试剂 MCT (Sigma公司)；TRIzol (Invitrogen公司)；AMV逆转录试剂盒、PCR引物(TaKaRa生物工程有限公司)；抗NBL1抗体(Proteintech公司)；抗p-Smad1/5/8抗体(Cell Signaling Technology公司)；……