不明原因复发性自然流产患者HVEM基因多态性检测研究*

肖 海，娄桂予，张 倩，郭谦楠，张照婧，吴 东，张梦汀，高 越，廖世秀△

(1.河南省人民医院医学遗传研究所，郑州 450003；2.郑州大学基础医学院医学遗传与细胞生物学系 450003)

妊娠期间的胎儿和母体之间存在着复杂的免疫调节，母-胎界面调节性T细胞(Treg)优势分化，有利于妊娠的顺利进行。疱疹病毒侵入介质(herpes virus entry mediator,HVEM)基因上的一些单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点会对基因的表达或者功能造成影响，目前在很多肿瘤的研究中发现HVEM基因多态性会影响Treg的分化，进而影响疾病的发生发展[1]。目前尚无HVEM基因多态性与不明原因复发性自然流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)关系的相关报道。本文通过对河南汉族人群的HVEM基因 rs1886730和rs2234167位点进行研究，探讨HVEM基因多态性与河南汉族人群URSA的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 病例组为2017年1-12月在河南省人民医院产前诊断中心就诊的246例复发性流产女性。入选标准：自然流产大于或等于3次，排除感染、血型不合、生殖道畸形、免疫因素、内分泌异常、胚胎染色体异常等致病因素。对照组为2017年1-12月在河南诚信法医司法鉴定所进行亲子鉴定生育过1名及以上正常健康孩子且无复发性流产史的256例女性。本研究经河南省人民医院伦理委员会批准。所有研究对象知情同意后分别抽取乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血2 mL。

1.2方法

1.2.1rs1886730和rs2234167位点SNP检测 采用厦门致善公司的Lab-Aid 820核酸提取Mini试剂提取样本基因组DNA，PCR扩增后利用Sanger法测序检测样本基因型。根据参考文献[1]设计引物，引物序列见表1，由生工生物工程(上海)股份有限公司进行合成。……