高效液相色谱法测定蔗糖-6-乙酯的研究

陈虹

【摘  要】蔗糖-6-乙酯是制备三氯蔗糖的关键中间体，建立一种准确、快速的分析方法测定蔗糖-6-乙酯是这种甜味剂生产质控关键。采用高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）检测蔗糖-6-乙酯，使用ZORBAXSB-Aq色谱柱，以甲醇/水（5：90，v/v）为流动相，流速为0.8mL/min，蒸发光漂移管温度为85℃，氮气流速为1.5L/min。对外标法检测蔗糖-6-乙酯进行了方法学验证。两种方法的线性范围均为1.10～11.03mg/mL，线性相关系数均在0.99以上，其中外标法的RSD值均小于3.0%。这种方法能检测蔗糖-6-乙酯。本研究建立的方法可用于蔗糖-6-乙酯的含量检测，并为蔗糖酯的检测分析提供了参考。

【关键词】高效液相色谱法;测定蔗糖-6-乙酯;分析研究

[中图分类号]F66              [文献标识码]A

1材料与方法

1.1仪器与试剂

固定化疏棉状噬热丝孢菌脂肪酶（TLIM酶），250IUN/g，诺维信生物技术有限公司;蔗糖八乙酸酯，分析纯，纯度为98%，阿拉丁试剂有限公司;蔗糖-6-乙酯为实验室自制，纯度>95%;甲醇、乙腈为色谱纯，Sigma;蔗糖、乙酸乙烯酯、叔戊醇、二甲基亚砜均为化学纯。Agilent1200高效液相色谱仪，美国Agilent公司;Alltech3300蒸发光散射检测器，美国Grace公司;HH-4水浴恒温震荡器，金坛市江南仪器厂。

1.2试验方法

1.2.1样品的制备

称取10.3g蔗糖（0.3mol/L）、25.8g（3mol/L）乙酸乙烯酯、4gTLIM酶、1g4A分子筛于250mL具塞三角瓶中，再加入叔戊醇：二甲基亚砜（83：17）的溶剂，置于恒温摇床中，30℃、180r/min的条件下反应16h。反应结束后，反应液在3500r/min的条件下离心10min，取上清液，进液相分析，每组3个平行。

1.2.2高效液相色谱条件的选择

高效液相色谱法是一种较为普遍的分析方法，其分离度好、检测灵敏度高、方便快捷，通常与紫外检测器或示差折光检测联用。由……