结直肠癌组织中MMP-7和SLC12A5表达的检测意义

张 晴 李 丹 岳 欣 王旭波

（南京中医药大学附属徐州市中医院，江苏 徐州 221000）

结直肠癌是较为常见的一种消化道恶性肿瘤，其发生以及发展是涉及多步骤和多基因的复杂过程[1-2]。MMP-7以及SLC12A5在多种恶性肿瘤组织中均具有较高的表达水平，其可能在肿瘤的转移及侵袭过程中发挥着重要的作用。本研究主要探讨了结直肠癌组织以及癌旁正常组织中MMP-7和SLC12A5表达水平的临床检测意义，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2014年6月至2018年6月在我院病理科采取胃肠肿瘤外科手术切除的60例结直肠癌组织，患者资料：男34例，女26例；年龄34～75岁，平均（49.36±10.23）岁；肿瘤分化程度：低分化患者19例，中分化患者27例，高分化患者14例；肿瘤直径：＜5 cm者27例，≥5 cm者33例；肝转移13例；淋巴结转移31例；脉管浸润16例；TNM分期：Ⅰ期患者5例，Ⅱ期患者7例，Ⅲ期患者28例，Ⅳ期患者20例。并且取肿瘤组织超过5 cm，病理组织学检查结果为正常的60例结直肠癌旁正常肠组织作为对照。

1.2 研究方法：采取免疫组化PV-9000两步法检测结直肠癌和癌旁正常肠组织MMP-7和SLC12A5的表达水平。对石蜡标本常规进行切片、脱蜡以及水化；使用3%过氧化氢10 min，将内源性的过氧化物酶灭活；然后滴加一抗，保持4 ℃的温度过夜；采取磷酸缓冲盐溶液冲洗2 min，共冲洗3次，再滴加试剂1，使用温箱孵育20 min；采取磷酸缓冲盐溶液冲洗2 min，共冲洗3次，再滴加试剂2，使用温箱孵育半个小时；采取磷酸缓冲盐溶液冲洗2 min，共冲洗3次，采取二氨基联苯胺法进行染色，给予苏木精复染、蒸馏水冲洗、梯度乙醇脱水、中性树胶封固以及二甲苯透明。判定方法：MMP-7仅有少量的阳性染色表达在细胞膜，大部分的阳性染色集中在细胞质中，呈褐色或者棕黄色的颗粒；SLC12A5仅有少量的阳性染色表达在细胞核，大部分的阳性染色集中在细胞质中，呈褐色或者棕黄色的颗粒。3分表示深黄色，2分表示黄色，1分表示浅黄色，0分表示无着色。4分表示＞75%，3分表示51%～75%，2分表示26%～50%，1分表示6%～25%，0分表示＜5%；将上述二者分数进行相乘，“+++”表示9～12分，“++”表示5～8分，“+”表示1～4分，“－”表示0分。比较结直肠癌组织中以及结直肠癌旁正常组织的MMP-7和SLC12A5表达水平。

1.3 统计学分析：采用SPSS19.0软件，组间对比用t检验，组间率的比较用χ2检验，以P＜0.05表明差异有统计学意义。

2 结果

MMP-7在结直肠癌组织中阳性表达率为81.67%（49/60），明显高于结直肠癌旁正常组织的28.33%（17/60）（χ2=12.341，P＜0.05），见表1。

表1 MMP-7在结直肠癌组织与正常组织中的表达（n）

SLC12A5在结直肠癌组织中阳性表达率为83.33%（50/60），明显高于结直肠癌旁正常组织的31.67%（19/60）（χ2=11.379，P＜0.05），见表2。

表2 SLC12A5在结直肠癌组织与正常组织中的表达（n）

3 讨 论

结直肠癌的转移以及浸润是一个复杂的、渐进的过程，会对细胞外基质造成破坏[3]。MMPs家族可以对细胞外基质中的所有成分进行降解，因此在结直肠癌患者的发展过程中发挥着重要的效果[4-6]。MMP-7作为一种基质分解素，其表达具有较高的肿瘤细胞特异性，可以降解层黏蛋白、纤维结合素以及蛋白多糖等。因而，MMP-7在恶心肿瘤的浸润转移方面得到广泛的关注[7]。SLC12A5可以通过抑制核酸内切酶-G以及凋亡诱导因子介导的凋亡信号通路，发挥抗凋亡效果，而促转移效果则是通过对基质体系结构的纤维连接蛋白以及基质金属蛋白酶等关键要素进行调节[8-9]。本研究结果发现，MMP-7在结直肠癌组织中阳性表达率为81.67%（49/60），明显高于结直肠癌旁正常组织的28.33%（17/60）（χ2=12.341，P＜0.05）；SLC12A5在结直肠癌组织中阳性表达率为83.33%（50/60），明显高于结直肠癌旁正常组织的31.67%（19/60）（χ2=11.379，P＜0.05）。表明结直肠癌组织中具有较高的MMP-7和SLC12A5表达水平。SLC12A5的异常高表达在结直肠癌患者的发生和演进过程中具有重要的作用，而SLC12A5诱导的MMP-7过表达则有可能是促进结直肠癌患者发生转移和浸润的一个重要途径。

综上所述，结直肠癌组织中具有较高的MMP-7和SLC12A5表达水平，应采取免疫组化法对其表达进行检测。