固相萃取LC-MS/MS法测定疏血通注射液中次黄嘌呤浓度*

王献瑞 ，赵西子 ，王晓明 ，郭亚卿 ，潘桂湘 ，黄宇虹

（1.天津中医药大学，天津市现代中药重点实验室-省部共建国家重点实验室（培育），天津 301617；2.天津中医药大学第二附属医院，天津 300250）

疏血通注射液是由水蛭[1-2]、地龙[3-4]两味动物类中药经低温提取和膜分离等工艺制成的中药复方制剂[5]，具有活血化瘀、通经活络的功效，临床常用于瘀血阻络所致的缺血性中风病中经络急性期，症见半身不遂、口舌歪斜、语言謇涩[6-7]。疏血通注射液化学成分复杂，含有多肽、多糖、氨基酸、次黄嘌呤等物质[8-10]，目前其真正发挥药效作用的物质基础尚不明确。据文献报道[11-12]，次黄嘌呤具有明确的生物活性，能透过细胞膜进入细胞内，提高多种酶的活性，参与机体一些重要生理机能的调节。因此，本文以次黄嘌呤为指标成分，建立液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法对其进行定量分析，以期为疏血通注射液质量分析、评价以及质量标准的制定提供参考和依据。

目前，疏血通注射液中次黄嘌呤的测定，采用的大多是高效液相色谱-紫外法（HPLC-UV）[13-14]，检测波长为254 nm。由于疏血通注射液中众多成分在254 nm处具有紫外吸收，需进行长达50 min的梯度洗脱，使次黄嘌呤与注射液中的其他干扰物质实现完全的色谱分离，次黄嘌呤出峰时间为13min，整个分析周期相对较长[15]。LC-MS/MS具有高选择性、高灵敏度、高准确性的特点[21]，尤其是具有独特的质量分辨能力，能在复杂基质中专属、灵敏、准确地检测某个或某几个成分。本研究采用固相萃取LC-MS/MS法测定疏血通注射液中次黄嘌呤浓度，分析时间缩短至3.50 min，次黄嘌呤出峰时间为1.02 min，可较大程度提高分析的效率。……