化学发光法和酶联免疫法检测HbeAg的比较

刘悦悦

【摘 要】目的：通过化学发光法与酶联免疫法检测HbeAg的结果比对，探讨酶联免疫法作为初筛方法时不同血清浓度的漏检率。方法：采用回顾性分析，对同时检测化学发光法和酶联免疫法的303例慢性乙肝患者标本进行HbeAg的检测与分析对比。结果：化学发光法检测阳性的结果76例，阴性227例，其中化学发光法阴性的标本酶联免疫法的阴性率为100%;化学发光法阳性的标本，酶联免疫法阳性50例，阴性26例，总漏检率为34.2%，对HbeAg化学发光法检出浓度分组，其中1S/Co-20S/Co的漏检率为75%;20S/Co-100S/Co的漏检率为40%;>100S/Co的漏诊率为5%。结论：酶联免疫法对低水平的HbeAg存在较高的漏检率，对乙肝阳性患者应采用化学发光法作为酶联免疫法的补充。

【关键词】乙型肝炎E抗原;化学发光免疫分析法;酶联免疫吸附分析法

【中图分类号】R512.6【文献标识码】A【文章编号】1005-0019（2019）21--01

乙型肝炎E抗原，是乙肝病毒核心颗粒中的一种可溶性蛋白质。它的出现迟于HBsAg，而消失却早于HBsAg，所以是人体感染HBV后跟随HBsAg出现的第2个血清学抗原标志物。HBeAg在乙肝活动期检出率升高，表明肝细胞有较严重的损伤，患者有很强的传染性。在未开展 HBV-DNA 定量检测的单位，HBeAg 常作为评价 HBV 复制的血清标志物[1]。已有研究表明，目前医疗机构检测中，血清 HBeAg的检测一般采用酶联免疫吸附试验（ELISA），但该法对于低水平血清 HBeAg 通常很难测出，易造成漏检[2-4]。探讨化学发光法优越性的文章已有很多，但对化学发光中HBeAg 浓度分区研究ELISA法漏检率的还较少。本文利用回顾性分析，研究ELISA法的漏检率及易漏检血清浓度，为临床解释两种方法學结果差异给出数值依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 采集我院2018年1月-12月同时进行CLIA法和ELISA法检测HbeAg的慢性乙肝患者（性别、年龄均不限，患者符合中华医学会肝病学会中华医学会感染病学会联合修订的《慢性乙型肝炎防治指南（2010 年版）》[3]）数据共303例。

1.2 仪器与试剂 选择惠州市中大惠亚医院检验科实验室使用的有严格日常维护和保养的全自动微粒子酶联免疫分析系统Abbottci2000用于CLIA法检测，使用配套的美国雅培公司的HbeAg检测试剂。ELISA法试剂由北京万泰生物科技有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 CLIA法采用双抗夹心测定方法。以顺磁性微珠作为包被载体，吖啶酯作为发光剂 标记抗体。化学发光物质经氧化剂的氧化后，形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测。

1.3.2 ELISA 法 应用双抗体夹心法定量检测 HBeAg。严格按照实际说明书操作。

1.4 阳性判断标准 CLIA法中HBeAg以 S/Co 为单位，结果≥1.0 时判为阳性。ELISA法根据实际说明书要求判断。

2 结果

2.1 标本共计 例，CLIA法检测阴性227例，对应的ELISA法结果中阴性227例，符合率100%;CLIA法检测阳性76例，对应的ELISA法结果中阳性50例，阴性26例，符合率65.8%，漏检率34.2%。

2.2 将CLIA法阳性的结果进行分组，1.0 S/Co-20.0 S/Co为低水平组，20 S/Co-100 S/Co为中水平组，>100S/Co为高水平组，分别比对其与ELISA法结果的符合率与漏检率。

3 讨论

目前由于两种方法的价格差距较大，酶联免疫法在门诊及体检病人中仍是主流，对于部分慢性乙肝患者，监测病情时使用化学发光法成本高，酶联免疫法能够减轻患者负担。酶联免疫法的特异性高，但从数据显示，酶联免疫法有较高的漏诊率（34.2%），这使得酶联免疫法在慢性乙肝患者中的检测中弊病较多，常有酶联免疫法患者HBeAg阴性患者复查时使用化学发光法而得到阳性的结果，这种结果的不符造成临床医生解释的困难以及患者对检验结果的不信任。

这里我们利用CLIA法高灵敏度，高特异性，重复性好等优点[5]，作为参照，使用ELISA法对不同浓度的HBeAg 进行有效检测，分组讨论其漏检率。通过数据得出，在低浓度组（1.0 S/Co-20.0 S/Co）ELISA法漏检率高达75%，ELISA作为初筛方法并不完备，这时增加CLIA检测可以弥补ELISA法的不足，对乙型肝炎临床分型、病程发展、转归及疗效观察均有一定的指导意义。临床医师对患者进行结果解析时要尽量从方法学限制上解释其漏诊率，消除患者疑虑。

参考文献

郑定容，黄龙，周伟.CLIA和ELISA法检测乙肝HBeAg的比较[J].热带医学杂志，2013，13（10）：1233-1235.

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廖冰洁，周迎春.化学发光法和时间分辨荧光免疫分析法检测低浓度乙肝表面抗原的应用分析[J].按摩与康复医学：中旬刊，2012，3（1）：2-3.