存活素与血管内皮生长因子在甲状腺癌中的表达及其意义

滕小宇

甲状腺癌作为临床常见的肿瘤疾病，对其尽早诊断治疗及预后分析极为重要［1］。凋亡抑制蛋白加速属于高度保守的抗凋亡基因表达产物，存活素属于其中的新成员，具有凋亡调控作用，其可能抑制凋亡信号传导通路的终末效因子半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)起到凋亡作用［2，3］。为此，本次研究对细胞凋亡抑制因子存活素与血管内皮生长因子在甲状腺癌中的表达及其意义进行了探讨，详细报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2016年3月～2018年3月收治的58例甲状腺癌患者、10例甲状腺腺瘤患者及10例甲状腺组织正常者作为研究对象。甲状腺癌患者中男24例,女34例；年龄20～60岁,平均年龄(42.62±6.85)岁；甲状腺乳头状癌(PTC)30例,甲状腺滤泡状癌(FTC)12例,甲状腺髓样癌(MTC)12例,甲状腺未分化癌 (UTC)4例；临床分期：Ⅰ、Ⅱ期42例,Ⅲ、Ⅳ期16例；淋巴结转移22例,淋巴结未转移36例。甲状腺腺瘤患者中男3例,女7例；年龄25～55岁,平均年龄(42.16±5.92)岁。甲状腺组织正常者中男4例,女6例；年龄25～58岁,平均年龄(42.33±6.47)岁。

1.2检测方法 采用链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法检测三组研究对象的存活素水平与血管内皮生长因子表达情况。严格依据试剂盒操作说明开展,标本均预先进行苏木精-伊红染色法(HE)染色重新确诊分类,检测中进行切片脱蜡水化,微波修复抗原及山羊血清封闭,再滴加抗存活素、血管内皮生长因子抗体,过夜以生物素标记二抗及ABC复合物孵育,利用DAB显色,再利用苏木素复染后封片。将PBS代替一抗平行操作染色作为阴性对照,将乳腺癌阳性片作为阳性对照。

1.3观察指标及判定标准 统计甲状腺癌患者、甲状腺腺瘤患者及甲状腺组织正常者组织存活素阳性表达情况；比较甲状腺癌患者不同组织分型、不同临床分期及淋巴结是否转移存活素、血管内皮生长因子阳性表达情况。阳性判断标准［4］：组织切片显示胞浆或胞核染为淡黄至棕黄色为阳性细胞标识。计数5个高倍视野各100个细胞,计算阳性细胞百分率并进行分类,如0：阳性细胞＜10%,1：阳性细胞10%～25%,2：阳性细胞26%～50%,3：阳性细胞51%～75%,4：阳性细胞＞75%。依据染色程度分类,弱(+)：淡黄色或仅个表细胞呈黄至棕黄色,强度(+++)：呈黄至棕黄色,中等(++)：介于两者之间。将染色强度与阳性细胞百分数相乘评价阳性(≥1)率。

1.4统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据统计分析。计数资料以率(%)表示，采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1甲状腺癌患者、甲状腺腺瘤患者及甲状腺组织正常者组织存活素阳性表达情况 甲状腺癌患者组织中32例(55.17%)表达阳性,甲状腺腺瘤患者组织中1例(10.00%)呈弱阳性表达,甲状腺组织正常者组织中未见表达。

2.2甲状腺癌患者不同组织分型、不同临床分期及淋巴结是否转移存活素阳性表达情况比较 甲状腺未分化癌和甲状腺髓样癌存活素阳性表达率100.00%、91.67%显著高于甲状腺滤泡状癌的41.67%和甲状腺乳头状癌的40.00%,差异有统计学意义(χ2=4.15、5.10,χ2=6.75、9.24,P＜0.05)；临床分期Ⅲ、Ⅳ期存活素阳性表达率81.25%显著高于Ⅰ、Ⅱ期的45.24%,差异有统计学意义(χ2=6.08,P＜0.05)；淋巴结转移存活素阳性表达率81.82%显著高于淋巴结未转移的38.89%,差异有统计学意义(χ2=10.18,P＜0.05)。见表1。

表1 甲状腺癌患者不同组织分型、不同临床分期及淋巴结是否转移存活素阳性表达情况比较(n,%)

2.3甲状腺癌患者血管内皮生长因子蛋白阳性表达情况 甲状腺未分化癌血管内皮生长因子蛋白阳性表达率100.00%(4/4)显著高于甲状腺髓样癌的41.67%(5/12)，差异有统计学意义(χ2=4.15，P＜0.05)；Ⅲ、Ⅳ期阳性表达率93.75%(15/16)显著高于Ⅰ、Ⅱ期的40.48%(17/42)，差异有统计学意义(χ2=4.14，P＜0.05)；淋巴结转移阳性表达率90.91%(20/22)显著高于淋巴结未转移的33.33%(12/36)，差异有统计学意义(χ2=4.14，P＜0.05)。

3 讨论

根据相关研究可知，死亡蛋白酶系统是细胞凋亡信号传导的重要途径，而caspase-3作为中心分子，在细胞生理和病理性死亡中均参与，对启动细胞凋亡有明显作用，而存活素抗凋亡功能能够对caspase-3产生直接抑制作用，阻断凋亡调节通路。而且一些研究发现，caspase-3表达与正常甲状腺组织表达相似，即caspase-3具有独特的存在方式，其需激活后才促凋亡，存活素可能无法全面抑制，因此无法将其作为甲状腺癌诊治的有效依据。本次研究结果显示，甲状腺癌患者组织中32例(55.17%)存活素表达阳性，甲状腺腺瘤患者组织中1例(10.00%)存活素呈弱阳性表达，甲状腺组织正常者组织中未见存活素表达。表明存活素在在正常甲状腺和良性甲状腺肿表达不明显，而在甲状腺癌组织中表达显著，认为其与甲状腺癌的发生关联较大，其能够阻断凋亡，促使转化细胞异常存活，并参与甲状腺癌的发展［5］。研究结果显示，存活素与血管内皮生长因子阳性表达中，均以甲状腺未分化癌最高，临床分期Ⅲ、Ⅳ期及淋巴结转移偏高，表明在相对恶性分期、转移及类型中表达更加显著，提示其可预测甲状腺癌的侵袭性和不良预后。而且其与血管内皮生长因子表达呈现相同变化趋势，则可分析其可能与血管内皮生长因子介导参与血管生成，与学者研究结果存在相似性［6］。

综上所述，存活素与血管内皮生长因子参与甲状腺癌的发生发展，其中存活素阻抗细胞凋亡，且与血管内皮生长因子协同促进血管生成，具有较高的研究价值。