杨 军,谢敬辉,高 超,刘开政
VE-cad-Fc功能化透明质酸水凝胶的制备与表征
杨 军1, 2,谢敬辉1, 2,高 超1, 2,刘开政1, 2
(1. 南开大学生命科学学院,天津 300071;2. 南开大学生物活性材料教育部重点实验室,天津 300071)
为了提高透明质酸水凝胶的生物学功能,本研究利用两步迈克尔加成反应及点击化学反应制备了人血管内皮钙黏素融合蛋白(VE-cad-Fc)功能化的透明质酸水凝胶,并进一步研究了其对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的影响.核磁共振光谱检测及凝胶时间检测显示,透明质酸主链丙烯酰肼取代率为16%,,融合蛋白功能化透明质酸以DTT交联的凝胶化时间约为30,min.ELISA检测显示水凝胶中化学键合Fc结构域特异性结合多肽可以显著提高融合蛋白的长期负载稳定性.2D/3D细胞黏附、增殖与活细胞染色实验结果显示,水凝胶中利用Fc结构域固定融合蛋白显著改善人脐带间充质干细胞的黏附、增殖,且促进水凝胶中hUC-MSCs的长期克隆化生长.作为一种细胞培养基质(2D/3D培养),这种融合蛋白功能化的水凝胶材料在组织工程、再生医学等领域将有非常广阔的应用前景.
水凝胶;透明质酸;人脐带间充质干细胞;细胞黏附;细胞增殖
透明质酸(HA)是一种广泛分布于多种组织细胞外基质中的糖胺聚糖,具有较好的生物相容性,对组织器官生长发育、疾病发生以及损伤修复均发挥重要作用[1-2].因此,基于透明质酸的水凝胶已经在组织工程支架、细胞三维培养以及再生医学研究中被广泛应用.透明质酸能够通过与多……