磁性壳聚糖微球固定化漆酶的制备及酶学性质研究

杨 捷，王梦祎，林沚葳，林 娟，叶秀云

(福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室，福建 福州 350108)

0 引言

漆酶(EC 1.10.3.2)是一种含铜的高效氧化酶，可以催化各种芳香族化合物的氧化[1].漆酶在自然界中广泛存在，其中关于白腐真菌漆酶的研究最多[2].大多数漆酶产生菌产量低，且漆酶在工业条件下容易失活，使其在实际应用中受到限制.酶的固定化可以实现酶制剂的重复利用，降低使用成本，并增强其操作稳定性[3].酶的固定化方法主要有包埋、吸附、交联等；已经用于漆酶固定化的载体包括纳米材料、介孔材料、凝胶和亲水性微滤膜等[1]，其中纳米材料因其大的比表面积，良好的生物相容性和催化效果成为近年来的研究热点[4].此外，也有使用双功能交联剂(例如戊二醛)直接无载体固定化漆酶的报道，但该方法得到的固定化漆酶机械强度差、回收困难[5].

近年来，使用纳米磁性体吸附脂肪酶、β-D-半乳糖苷酶、醇脱氢酶和漆酶[6-9]，都显示出了良好的固定化效果.为了避免磁芯的磁诱导自聚集，在这些纳米颗粒上附加无机或聚合物涂层，可以提高这些纳米结构的功能性或生物相容性[10-11].天然高分子凝胶载体(如壳聚糖、海藻酸钙等)以及有机合成聚合物(如聚丙烯酰胺、聚乙烯亚胺等)，由于表面具有功能基而经常被用作制备载体的基础材料[1].其中，壳聚糖(β-1,4-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖)是一种氨基多糖，其分子链上的氨基(-NH2)和羟基(-OH)易于进行化学改性作为与生……