高效液相色谱仪的故障分析及处理措施

万祉妤

通化市计量检定测试所 吉林通化 134000

1 高效液相色谱仪的工作使用原理

高效液相色谱仪主要由进样系统，分离系统，检测系统，数据处理系统等多种系统组成，流动相通过高压泵注入到色谱柱当中，由于样品在不同的色谱柱当中分配系数大大不同，这就会使得各个组分在色谱柱中会发生快速分离，被分离出来的单个组别会逐步的通过检测仪器进行检测，最终得出的信号，经过数据处理，系统处理之后加以处和保存，使得整个分析过程可以顺利的完成。

2 高效液相色谱仪工作中出现的故障

2.1 高压输液系统发生的故障

该系统主要设备包括输液高压泵和输液贮存器等，在两种流动输液过滤管的顶部分别进了输液过滤器的自动安装，而这种贮液器主要的作用也就是用来装输液流动，当盛装贮液器顶部受到了交互相应的气体污染情况时，通常这种情况下都会直接使得输液过滤器发生堵塞，导致基本沿线浓度波动，流速过高而起不到有效的合理控制，进一步就会导致样品基线浓度提高，不能对被测样品的组分含量进行准确的质量检测。高压泵的正常工作状态稳定度虽然很高，却起不到有效的运行保证[1]。在这种情况下，也就会容易出现高效液相色谱仪由于检测分析结果的工作准确性过高，不能起到有效运行的情况。

2.2 基线噪声增大

在实验过程当中，导致基线噪声增大的主要原因有以下几点。首先，如果在紫外探测器中氘的能量太低，解决的办法是检查灯在230nm处的能量值。如果能量值太低，则需要更换氘。其次，当检测器中的流动池受到污染时，我们可以观察到参考池与样品池之间的能量比。如果检测器中的流动电池受到污染，样品电池的灯能将远低于参考电池。

2.3 分离系统也会发生相应的故障

在高效液相色谱仪中，分离系统占据着至关重要的位置，是其关键和核心，发挥着重要的作用并会对分析结果产生重大影响。同时，对于色谱柱的使用时间来说，对其产生直接影响的因素主要包括两个方面，分别是柱压和柱效两个指标，一般情况下，当色谱柱的柱压不在稳定的状态下时，需要对其采取相应的措施和手段，对其进行报废处理，这种情况的出现也是有着相应原因的，主要是因为色谱柱堵塞所造成的[2]。

3 高效液相色谱仪故障处理

3.1 对高压输液系统故障进行有效的处理

在对原料进行冲洗处理的过程中，对一个贮液器需要进行充分的冲洗处理，需要在规定的处理时间内，用超纯水和柠檬酸对贮液器进行清洗，在该处理步骤完成之后，再用大量超纯

水对其原料进行清水冲洗。当一个贮液器需要采用各种溶剂试液瓶处理的时候，在对原料进行合理应用之后，必须要对瓶内废弃物进行处理，通过采取强有效的措施后，可以避免瓶内微生物的生长[3]。同时，还要对各种超声波试剂进行合理的应用，首先清洗试液过滤器，然后对高效率的液相色谱仪的使用专用溶剂试液及其他试剂原料进行处理，从而实现试液流动的合理配置。

3.2 对基线噪声大的处理措施

是先将色谱柱拆除，然后将色谱柱与一个双向管道连接，分别用去离子水、甲醇或异丙醇洗涤。当样品池的灯能达到参考池灯能的70%左右时，检测器的流动池将被清洗干净。另外，如果以上方法不能清洗循环槽，此时可以使用35%硫酸溶液和30%硝酸溶液进行清洗，然后循环槽和溶剂过滤头用纯净水清洗至中性，这样可以有效的改烧基线噪声过大的问题。

3.3 分离系统故障处理

对于液体分离色谱系统发生故障，主要可以采取四种有效的故障处理方法和预防措施：

（1）控制色谱柱pH值，允许的数值适用范围中合理设置控制色谱流动柱的pH数值。

（2）我们在分析多种色谱纯水性试剂与超纯水实验时，应该多次进行实验并对样品进行过滤，利用0.45μm厚的滤膜过滤进行操作，流动柱存在的问题会造成色谱柱温度升高，会造成样品色谱峰的波形变宽。

（3）使用在线色谱过滤器或者是在线保护柱即预柱，由于使用后无法将白色固体粒状颗粒中的物质全部进行消除，且一旦将这些白色固体粒状颗粒物质带入样品到液相色谱柱，就会直接导致柱效的下降，或导致柱效的电压发生明显的变化，并用分段法排查堵塞。

（4）应该对液相色谱柱使用的溶剂要进行多次冲洗工作，每次在使用高效率的液相色谱仪之后，要利用高度过渡的盐流动再次冲洗整个色谱柱，再次使用具有缓冲性的盐冲洗，然后再次利用过度的盐流，最后使用硫酸甲醇等物质进行溶剂清洗，有效的保存液相色谱柱，其中反向冲洗色谱柱流量不能过大，否则会冲走色谱柱的填料从而造成柱效降低。

4 结语

综上所述，高效液相色谱仪属于精密仪器，在使用时精密仪器常常会出现相应的故障问题，这对它精密度的影响是相对较大的，因此，掌握好故障产生的原因以及如何去排除这些故障，不仅会提高分析结果的准确性，而且还会延长仪器的使用寿命。