肺康明化学成分的研究

2020-01-17 08:30陈美安甄丹丹
中成药 2020年7期
关键词:针状分子式乙酸乙酯

陈美安,甄丹丹

(广西中医药大学,广西南宁 530001)

支原体是目前己知能独立生活缺乏细胞壁的、大小介于细菌与病毒之间的最微小原核微生物[1],大多具有致病性,其中对我国禽业危害最大的主要是鸡毒支原体,其发病率高达50%~80%。发病鸡病程较长,大多呈现隐性感染,导致雏鸡弱雏率增加,肉鸡生长发育迟缓,蛋鸡产蛋率降低,正引起其他国家对该支原体的重视[2-3]。

现代药理研究及临床实践表明,大多数中草药具有清热解毒、抗菌、抗炎作用,可提高机体免疫功能,防治呼吸道感染。肺康明由南板蓝根配伍两面针、白鲜皮组成,全方以清热解毒为主,截断病邪,辅以活血化瘀,以行气活血发挥功效,具有很好的体外抗鸡毒支原体活性,但其药效物质基础尚不清楚。因此,本实验对肺康明化学成分进行研究,从中发现20 个化合物,其中1、5、8、10、12~14、16~18、20 均为首次从该复方中分离得到。

1 材料

1.1 药物 两面针、白鲜皮、南板蓝根均购自广东深圳,经广西中医药大学朱意麟老师鉴定为正品,粉碎成粗粉,备用。

1.2 仪器与试剂 RE-52AA 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);AE100 电子分析天平(瑞士Mettler-Toledo 公司);YRT-3 熔点测定仪(天津大学精密仪器厂);ZAB-HS 双聚焦磁质谱仪(英国VG公司);AV-400 MHz 核磁共振仪(瑞士Bruker 公司);薄层层析用硅胶G、100~200 目和200~300目柱层析用硅胶(青岛海洋化工工厂);D101 型大孔吸附树脂(河北沧州宝恩化工有限公司)。除纯水外其余试剂均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司。

2 提取与分离

按1∶2∶3 比例称取两面针、白鲜皮、南板蓝根粗粉,总共30 000 g,按料液比1∶12 加入水浸泡30 min,回流提取90 min,共3 次,滤过,合并滤液,浓缩得总提取物,依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,减压浓缩,干燥,得氯仿部位(56.4 g)、乙酸乙酯部位(263.2 g)、正丁醇部位(748.5 g)。取氯仿部位50.0 g,经反复硅胶柱色谱,石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱,得化合物4(6.7 mg)、14 (23.8 mg)、2 (19.3 mg)、3(12.4 mg)、8 (14.3 mg)、15 (47.6 mg)、9(17.0 mg)。取乙酸乙酯部位100.0 g,经反复硅胶柱色谱,氯仿-甲醇梯度洗脱,得化合物2 (7.2 mg)、11 (24.1 mg)、10 (73.6 mg)、16 (43.6 mg)、5 (16.9 mg)、12 (27.5 mg)、6 (8.1 mg)、7 (13.6 mg)。取正丁醇部位100.0 g,经D101 大孔吸附树脂柱色谱,水-乙醇梯度洗脱,50%乙醇洗脱部分经反复硅胶柱色谱,氯仿-甲醇梯度洗脱,得化合物17 (83.2 mg)、1 (6.8 mg)、19 (17.1 mg)、13 (124.0 mg)、20 (15.9 mg);70%乙醇洗脱部分经反复硅胶柱色谱,氯仿-甲醇梯度洗脱,得化合物15 (83.2 mg)、18 (24.3 mg)。

3 结构鉴定

化合物1:黄色粉末状结晶(甲醇),ESI-MSm/z:354.0 [M+H]+,分子式C20H19NO5。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)δ:6.78 (1H,d,J=8.0 Hz,H-9),6.75 (1H,d,J=8.0 Hz,H-10),6.67(1H,s,H-4),6.65 (1H,s,H-1),6.00 (1H,d,J=1.2 Hz,2-OCH2O-),5.96 (1H,d,J=1.2 Hz,3-OCH2O-),5.94 (1H,d,J=1.2 Hz,7-OCH2O-),5.93 (1H,d,J=1.2 Hz,8-OCH2O-),4.24 (1H,brs,H-11),4.11 (1H,d,J=15.7 Hz,H-6a),3.45 (1H,d,J=15.7 Hz,H-6b),3.58 (1H,s,H-14),3.25 (1H,d,J=17.0 Hz,H-12a),3.11 (1H,dd,J=17.0,4.4 Hz,H-12b),3.08 (1H,t,J=2.8 Hz,H-13),2.28(3H,s,N-CH3);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:107.4 (C-1),145.2 (C-2),145.5 (C-3),111.8 (C-4),128.7 (C-4a),53.9 (C-6),117.0 (C-6a),143.0 (C-7),148.0 (C-8),109.5 (C-9),120.4 (C-10),131.2 (C-10a),72.3 (C-11),39.6 (C-12),125.6 (C-12a),42.0(C-13),62.8(C-14),101.0(2,3-OCH2O-),101.2 (7,8-OCH2O-),42.4 (N-CH3)。数据与文献[4]报道一致,鉴定为白屈菜碱。

化合物2:深蓝色粉末状结晶(氯仿),EI-MSm/z:262.0 [M]+,分子式C16H10N2O2。碘化汞钾反应、改良碘化铋钾反应、硅钨酸反应均呈阳性,可能为生物碱类化合物;与靛蓝对照品共薄层色谱,在氯仿-丙酮 (8∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯(6∶1)、正己烷-乙酸乙酯(9∶1)中展开,发现两者Rf值及显色行为一致,混合后熔点不下降(390~392 ℃),鉴定为靛蓝。

化合物3:紫红色针状结晶(氯仿),EI-MSm/z:262.0 [M]+,分子式C16H10N2O2。碘化汞钾反应、改良碘化铋钾反应、硅钨酸反应均呈阳性,可能为生物碱类化合物;与靛玉红对照品共薄层色谱,在氯仿-丙酮 (5∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯(4∶1)、石油醚-丙酮(10∶1) 中展开,发现两者Rf值及显色行为一致,混合后熔点不下降(348~350 ℃),鉴定为靛玉红。

化合物4:橘黄色粉末状结晶(氯仿),EI-MSm/z:254.0 [M]+,分子式C15H10O4。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)δ:12.01 (1H,s,1-OH),12.12 (1H,s,8-OH),7.83 (1H,d,J=8.4 Hz,H-7),7.69 (1H,d,J=8.4 Hz,H-5),7.65(1H,dd,J=8.4,1.8 Hz,H-6),7.28 (1H,s,H-2),7.10 (1H,s,H-4),2.47 (3H,s,3-CH3);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:162.8 (C-1),124.4 (C-2),149.4 (C-3),121.4 (C-4),124.6 (C-5),136.9 (C-6),119.9 (C-7),162.4 (C-8),192.6 (C-9),182.0 (C-10),133.7 (C-11),115.9 (C-12),133.3 (C-14),22.3 (C-15)。数据与文献[5]报道一致,鉴定为大黄酚。

化合物5:黄色针状结晶(甲醇-水),ESI-MSm/z:431.0 [M-H]-,分子式C21H20O10。1H-NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ:13.17 (1H,s,1-OH),11.24 (1H,s,6-OH),7.45 (1H,s,H-4),7.28(1H,d,J=2.1 Hz,H-5),7.15 (1H,s,H-2),7.00 (1H,d,J=2.4 Hz,H-7),5.08 (1H,d,J=7.8 Hz,H-1′),4.62 (1H,t,6′-OH),3.23~3.71 (6H,m,H-2′,3′,4′,5′,6′a,6′b),2.50(3H,s,3-CH3);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:161.0 (C-1),124.1 (C-2),146.8 (C-3),119.2 (C-4),108.3 (C-5),164.1 (C-6),108.2 (C-7),161.6 (C-8),186.4 (C-9),182.0 (C-10),114.4 (C-1a),132.0 (C-4a),136.4 (C-5a),113.3 (C-8a),100.8 (C-1′),73.2 (C-2′),76.3 (C-3′),69.4 (C-4′),77.3(C-5′),60.5 (C-6′),21.3 (3-CH3)。数据与文献[6]报道一致,鉴定为大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物6:无色针状结晶 (氯仿),ESI-MSm/z:233.0 [M +H]+,分子式C14H16O3。1H-NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ:7.47 (1H,brs,J=0.7 Hz,H-5′),7.44 (1H,brs,H-2′),6.35 (1H,s,J=0.7 Hz,H-4′),4.89 (1H,s,H-3),2.25(1H,dd,J=19.6,6.4 Hz,H-6α),2.17 (1H,dm,H-6β),2.13 (3H,s,7-CH3),1.75~1.85(2H,m,H-5),1.62 (1H,m,H-4α),1.46(1H,dt,J=2.9,11.8 Hz,H-4β),0.86 (1H,s,9-CH3);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:169.8(C-1),83.4 (C-3),43.0 (C-4),20.3 (C-5),31.6 (C-6),148.4 (C-7),127.4 (C-8),32.0(C-9),139.8 (C-2′),120.6 (C-3′),108.5 (C-4′),143.4 (C-5′),18.2 (7-CH3),18.4 (9-CH3)。数据与文献[7]报道一致,鉴定为梣酮。

化合物7:无色针状结晶 (氯仿),ESI-MSm/z:455.0 [M +H]+,分子式C26H30O7。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)δ:7.41 (1H,d,J=2.0 Hz,H-23),7.40 (1H,s,H-21),6.52 (1H,d,J=12.0 Hz,H-1),6.37 (1H,brs,H-22),5.95(1H,d,J=12.0 Hz,H-2),5.46 (1H,s,H-17),3.66 (1H,s,H-15),2.96 (1H,t,J=14.0 Hz,H-6α),2.28 (1H,dd,J=14.0,4.8 Hz,H-6β),2.60 (1H,dd,J=14.0,4.8 Hz,H-5),1.89(1H,m,H-11α),1.91 (1H,m,H-11β),1.88(1H,m,H-12α),1.51 (1H,m,H-12β),1.48(3H,s,29,30-CH3),1.45 (3H,s,28-CH3),1.24 (3H,s,19-CH3),1.13 (3H,s,18-CH3);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:156.7 (C-1),123.0 (C-2),166.6 (C-3),83.9 (C-4),57.3(C-5),39.9 (C-6),207.4 (C-7),52.9 (C-8),49.2 (C-9),43.1 (C-10),32.7 (C-11),32.0(C-12),37.4 (C-13),65.0 (C-14),53.5 (C-15),166.8 (C-16),78.0 (C-17),21.1 (C-18),26.8 (C-19),120.1 (C-20),141.0 (C-21),109.7 (C-22),143.1 (C-23),19.4 (C-28),16.4 (C-29),16.9 (C-30)。数据与文献[7]报道一致,鉴定为黄柏酮。

化合物8:白色块状结晶 (氯仿),EI-MSm/z:370.0 [M]+,分子式C21H22O6。1H-NMR(400 MHz,CDCl3) δ:6.78~6.93 (6H,m,Ar-H),5.95 (2H,s,-OCH2O-),4.87 (1H,d,J=5.5 Hz,H-7′),4.41 (1H,d,J=6.0 Hz,H-7),4.12 (1H,d,J=9.5 Hz,H-9e),3.91 (3H,s,-OCH3),3.88 (3H,s,-OCH3),3.83~3.87(2H,m,H-9a,9′e),3.28~3.33 (2H,m,H-8,9′a),2.87 (1H,m,H-8);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:135.2 (C-1),106.5 (C-2),148.1(C-3),147.2 (C-4),108.1 (C-5),119.5 (C-6),87.7 (C-7),54.6 (C-8),71.0 (C-9),131.0 (C-1′),109.1 (C-2′),148.9 (C-3′),148.0 (C-4′),111.1 (C-5′),117.7 (C-6′),82.0 (C-7′),50.2 (C-8′),69.7 (C-9′),101.1(-OCH2O-),55.9 (-OCH3×2)。数据与文献[8]报道一致,鉴定为辛夷脂素。

化合物9:白色针状结晶(乙酸乙酯),EI-MSm/z:186.0 [M]+,分子式C11H6O3。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ:7.81 (1H,d,J=9.6 Hz,H-4),7.71 (1H,d,J=2.4 Hz,H-2′),7.70 (1H,s,H-5),7.50 (1H,s,H-8),6.84 (1H,dd,J=2.4,1.6 Hz,H-3′),6.38 (1H,d,J=9.6 Hz,H-3);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:161.0 (C-2),114.7 (C-3),144.0 (C-4),119.9 (C-5),124.9 (C-6),152.1 (C-7),99.9 (C-8),156.4(C-9),115.4 (C-10),146.9 (C-2′),106.4(C-3′)。数据与文献[9]报道一致,鉴定为补骨脂内酯。

化合物10:白色针状结晶(乙酸乙酯),EIMSm/z:152.0 [M]+,分子式C8H8O3。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)δ:9.82 (1H,s,-CHO),7.44 (1H,dd,J=8.1,1.2 Hz,H-6),7.42 (1H,d,J=1.2 Hz,H-2),7.04 (1H,d,J=8.0 Hz,H-5),6.49 (1H,brs,-OH),3.95 (1H,s,-OCH3);13C-NMR(100 MHz,CDCl3)δ:129.8(C-1),108.9 (C-2),151.8 (C-3),147.2 (C-4),114.4 (C-5),127.4 (C-6),56.0 (-OCH3),190.9 (-CHO)。数据与文献[10]报道一致,鉴定为香草醛。

化合物11:黄色粉末状结晶(甲醇),EI-MSm/z:286.0 [M]+,分子式C15H10O6。1H-NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ:7.43 (1H,d,J=8.1 Hz,H-6′),7.40 (1H,brs,H-2′),6.90(1H,d,J=8.1 Hz,H-5′),6.62 (1H,s,H-3),6.44 (1H,d,J=1.8 Hz,H-8),6.19 (1H,d,J=1.8 Hz,H-6);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:164.0 (C-2),103.1 (C-3),181.7 (C-4),161.4 (C-5),98.8 (C-6),164.1 (C-7),93.9(C-8),157.5 (C-9),103.9 (C-10),121.8 (C-1′),113.4 (C-1′),145.7 (C-3′),149.6 (C-4′),116.1 (C-5′),119.1 (C-6′)。数据与文献[11]报道一致,鉴定为木犀草素。

化合物12:淡黄色粉末状结晶(甲醇),ESIMSm/z:447.0 [M-H]-,分子式C21H20O11。1HNMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.66 (1H,s,5-OH),7.30 (1H,d,J=2.0 Hz,H-2′),7.25(1H,dd,J=8.4,2.0 Hz,H-6′),6.86 (1H,d,J=8.4 Hz,H-5′),6.39 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.20 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),5.26 (1H,brs,J=1.2 Hz,H-1″),3.12~3.98 (4H,m,H-2″~H-5″),0.81 (3H,d,J=6.0 Hz,5″-CH3);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:156.4(C-2),134.2 (C-3),177.7 (C-4),161.2 (C-5),98.6 (C-6),164.2 (C-7),93.6 (C-8),157.2 (C-9),104.0 (C-10),121.0 (C-1′),1115.4 (C-2′),145.1 (C-3′),148.4 (C-4′),115.6 (C-5′),120.7 (C-6′),101.8 (C-1″),70.3 (C-2″),70.5 (C-3″),71.1 (C-4″),70.0(C-5″),17.4 (C-6″)。数据与文献[12]报道一致,鉴定为槲皮苷。

化合物13:淡黄色粉末状结晶(甲醇),ESIMSm/z:445.0 [M-H]-,分子式C21H18O11。1HNMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.60 (1H,s,5-OH),8.68 (1H,s,6-OH),8.08 (2H,m,H-2′,6′),7.61 (2H,m,H-3′,4′,5′),7.05 (1H,s,H-3),7.01 (1H,s,H-8),6.20 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),5.26 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1″),3.36~4.06 (4H,m,H-2″~H-5″);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:163.5 (C-2),106.1 (C-3),182.5 (C-4),146.8 (C-5),130.6 (C-6),151.2 (C-7),93.7 (C-8),149.2 (C-9),104.7(C-10),130.8 (C-1′),126.3 (C-2′),129.1(C-3′),132.0 (C-4′),129.1 (C-5′),126.3(C-6′),99.9 (C-1″),72.8 (C-2″),75.2 (C-3″),71.2 (C-4″),75.4 (C-5″),170.0 (C-6″)。数据与文献[13]报道一致,鉴定为黄芩苷。

化合物14:白色粉末状结晶(氯仿-甲醇),EI-MSm/z:456.0 [M]+,分子式C30H48O3。1HNMR (400 MHz,C5D5N)δ:3.45 (1H,dd,J=12.0,6.0 Hz,H-3a),5.48 (1H,s,H-12),1.24(3H,s,H-23),1.22 (3H,s,H-27),1.05(3H,s,H-26),1.02 (3H,s,H-24),1.01(3H,d,J=6.6 Hz,H-30),0.96 (3H,d,J=6.6 Hz,H-29),0.89 (3H,s,H-25);13C-NMR(100 MHz,C5D5N)δ:39.0 (C-1),28.0 (C-2),78.0 (C-3),39.4 (C-4),55.8 (C-5),18.7(C-6),33.5 (C-7),42.4 (C-8),48.0 (C-9),37.4 (C-10),23.6 (C-11),125.6 (C-12),42.5 (C-14),28.6 (C-15),24.8 (C-16),48.0(C-17),53.5 (C-18),39.3 (C-19,20),31.0(C-21),37.4 (C-22),28.7 (C-23),15.6 (C-24),16.5 (C-25),17.4 (C-26),23.8 (C-27),179.8 (C-28),17.4 (C-29),21.3 (C-30)。数据与文献[14]报道一致,鉴定为熊果酸。

化合物15:白色片状结晶 (石油醚-乙酸乙酯),EI-MSm/z:284.0 [M]+,分子式C18H36O2。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ:2.36 (2H,t,J =7.5 Hz,H-2),1.63 (2H,m,H-3),1.26(28H,m,H-4~H-17),0.88 (3H,t,J=6.5 Hz,18-CH3);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:180.1(C-1),34.1 (C-2),31.9 (C-3),29.7~29.1(C-4~C-15),24.7 (C-16),22.7 (C-17),14.1(C-18)。数据与文献[15]报道一致,鉴定为硬脂酸。

化合物16:白色块状结晶 (氯仿),EI-MSm/z:256.0 [M]+,分子式C16H32O2。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)δ:2.35 (2H,t,J=7.5 Hz,H-2),1.64 (2H,m,H-3),1.25~1.30 (24H,m,H-4~H-15),0.87 (3H,t,J=6.8 Hz,H-16);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:179.8 (C-1),34.0 (C-2),24.7 (C-3),29.7~ 29.1(C-4~C-13),31.9 (C-14),22.7 (C-15),14.1(C-16)。数据与文献[16]报道一致,鉴定为棕榈酸。

化合物17:无色针状结晶(甲醇),ESI-MSm/z:191.0 [M-H]-,分子式 C6H8O7。1H-NMR(400 MHz,D2O)δ:2.74 (2H,d,J=16.0 Hz,H-2a,4a),2.92 (2H,d,J=16.0 Hz,H-2b,4b);13C-NMR (100 MHz,D2O)δ:173.2 (1,5-COOH),43.1 (C-2,4),73.1 (C-3),176.5(1′-COOH)。数据与文献[17]报道一致,鉴定为柠檬酸。

化合物18:无色针状结晶(甲醇),ESI-MSm/z:121.0 [M-H]-,分子式 C7H6O2。1H-NMR(400 MHz,CDCl3)δ:8.13 (2H,brd,J=7.4 Hz,H-2,6),7.61 (1H,brt,J=7.4 Hz,H-4),7.48(2H,brt,J=7.4 Hz,H-3,5);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:129.3 (C-1),130.2 (C-2,6),113.8(C-4),128.5(C-3,5),172.2(-COOH)。数据与文献[5,18]报道一致,鉴定为苯甲酸。

化合物19:白色针状结晶(甲醇),ESI-MSm/z:268.0 [M +H]+,分子式C10H13N5O4。1HNMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:8.34 (1H,s,H-8),8.13 (1H,s,H-2),7.35 (2H,brs,6-NH2),5.88 (1H,d,J=6.3 Hz,H-1′),5.44(2H,brs,2′,5′-OH),5.18 (1H,brs,3′-OH),4.60 (1H,m,H-2′),4.14 (1H,m,H-3′),3.96 (1H,dd,J=3.9,6.6 Hz,H-4′),3.67(1H,brd,J=12.1 Hz,H-5′a),3.54 (1H,brd,J=12.1 Hz,H-5′b);13C-NMR (100 MHz,DMSOd6)δ:152.3 (C-2),149.0 (C-4),119.3 (C-5),156.1 (C-6),139.9 (C-8),87.9 (C-1′),73.4 (C-2′),70.6 (C-3′),85.8 (C-4′),61.6(C-5′)。数据与文献 [19]报道一致,鉴定为腺苷。

化合物20:白色针状结晶(甲醇),ESI-MSm/z:242.0 [M-H]-,分子式C9H13N3O5。1H-NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ:7.84 (1H,d,J=7.6 Hz,H-6),7.13 (2H,brs,-NH2),5.76 (1H,d,J=5.5 Hz,H-1′),5.70 (1H,d,J=7.6 Hz,H-5),5.18 (1H,brs,3′-OH),4.60 (1H,m,H-2′),3.92 (1H,dd,J=3.8,3.0 Hz,H-3′),3.80(1H,dd,J=3.8,3.0 Hz,H-4′),3.64 (1H,d,J=12.0 Hz,H-5′a),3.55 (1H,d,J=12.0 Hz,H-5′b);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:155.6(C-2),165.7 (C-4),94.0 (C-5),141.7 (C-6),89.4 (C-1′),69.6 (C-2′),74.2 (C-3′),84.3 (C-4′),60.9 (C-5′)。数据与文献 [20]报道一致,鉴定为胞苷。

4 讨论

本研究从肺康明中分离得到20 个化合物,包括生物碱3 个、蒽醌类2 个、柠檬苦素类2 个、香豆素类1 个、木脂素类1 个、黄酮类3 个、三萜类1 个、脂肪酸3 个、有机酸1 个、酚类1 个、其他苷类2 个,其中1 来源于两面针,6~7、9、11、15 来源于白鲜皮,2~4、19 来源于南板蓝根,2~3 为主要活性成分。在首次发现的化合物中,8、10、12~14、16~18、20 可能来源于白鲜皮,5 可能来源于南板蓝根。中药在煎煮过程中由于相互作用,可能会促进一些成分的溶出或产生一些新成分,在肺康明中上述情况仍需进行研究。

根据实验结果可推测,肺康明发挥治疗鸡毒支原体感染疾病的药效物质主要有生物碱、蒽醌类、柠檬苦素类、香豆素类、木脂素类、黄酮类、三萜类、脂肪酸、有机酸、酚类等。现代药理研究发现,这些成分大多具有解热、抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等活性,全方作用机制可能是它们综合作用的结果。

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