色谱联用技术在药物分析中的应用分析

钟美春 江西青峰药业有限公司 温晓露 江西山香药业有限公司

色谱技术（hyphenated techniques in chromatography，HTC）是将具有高分离效能的色谱技术与能够获得丰富化学结构信息的光谱技术相结合的现代分析技术。目前，随着临床药理学、药动学、生物药剂学及治疗药物浓度监测等领域的迅猛发展，各种色谱联用技术在药品质量、环境科学、生命科学、法医学、商业检验研究工作中成为最引人瞩目的前沿技术之一。色谱技术因其理论的深入研究，技术的日异完善，仪器和组件的不断更新，使其在分析领域显示出强大的优势。色谱联用技术是将色谱分离装置与各种检测装置通过接口技术连接而成的一种新型的仪器分析技术，色谱联用技术的产生为药物分析领域带来了跨越性发展。色谱分析技术是药物分析研究的重要组成部分，色谱与光谱联用是药物分析经典常用技术，但色谱与质谱、核磁共振等联用技术则是近代发展起来的新技术。联用技术可从组分分离技术和检测分析技术的性能类别不同、连接方法不同分成许多种类。本文在查阅近几年色谱联用技术相关文献的基础上，梳理气相色谱、液相色谱、毛细管电泳与质谱、核磁共振谱联用技术在药物分析中的最新应用，并归纳了不同类型联用技术的应用特点。

一、气相色谱联用技术

（一）气相色谱与质谱联用分析技术

在药物分析领域气相色谱与质谱联用分析是应用较早的分析技术，其主要特点为具有较高的稳定性，目前主要应用于生物标记以及代谢组学方面[4]。同时气相色谱与质谱联合分析具有较高的敏感性，仅使用少量的样品便可以得到有效的分析结果。通过采用气相色谱与质谱联用分析可以有效弥补单一色谱分析技术的不足，能够对更多的组织成分进行检测[5]。大量实践表明，未加药组和加药组的气相色谱与质谱联合分析结果具有明显的差异。

（二）全二维气相色谱与飞行时间质谱联用分析技术

该联用分析技术以二维色谱技术作为基础，采用互补分析方式，可以充分掌握系统的优缺点，具有明显的挥发性特征。相比传统的一维气相色谱分析技术，该联用分析技术具有更大的色谱容量和较高的灵敏度，具有更高的结构鉴定能力。但是该联用分析方式分辨率相对较低，主要用于整体分析阶段。

二、液相色谱联用技术

（一）液相色谱与质谱联用分析技术

该联合分析技术应用时间较长，其在那些低挥发性以及热不稳定性药物分析中具有明显的优势[7]。经过多年的发展，该技术已经被广泛应用于多种药物的分析中。并且有些专家学者将液相色谱与质谱联用分析技术应用于生物制药领域，研究实践表明采用该联用技术能够得到完整的药物属性，最大程度保障分子的密度。

（二）液相色谱与串联质谱联用分析技术

该联用分析技术主要在生物学指标鉴定中具有明显的优势，特别是对代谢产物进行评估时往往具有较好的效果。相比常规的液相色谱与质谱联用分析技术，该联用分析技术能够有效开展分离操作，进而获得更高灵敏度以及更强特异性的数据[8]。随着该联用分析技术的不断发展，其已经被成功应用于药物成分的测定，并且可以根据其测定结果对患者给药进行指导。

（三）超高效液相色谱与串联质谱联用分析技术

该联用分析技术最早用于生物样品检查，随后被应用到对体内药物代谢进行检查。超高效液相色谱技术主要是基于高效液相色谱技术发展起来的一种新型色谱技术，其色谱柱粒径小于2μm，超高压系统压力大于105kPa，其能够同时开展大批量样品的检测，并且在较短的时间内对天然药物进行分离[9-10]。但是由于体内代谢产物检查的特殊性，需要在检查过程中采用高精准度的监测系统来满足检测的需求。

（四）液相色谱与电喷雾质谱联用分析技术

该联用分析技术作为新型药物分析技术在很大程度上拓展了生物学研究领域，特别是其在药物代谢产物学以及动力学等方面发挥了重要的作用。该联用分析技术充分结合了液相色谱的高分离能力以及质谱的高质量分辨能力，能够有效用于完整蛋白质以及修饰蛋白的肽序列测定、分子量测定以及蛋白质翻译后的修饰分析。

三、色谱-核磁共振联用技术

色谱-核磁共振联用技术是近些年来出现的一种新型技术形式，在复杂的药物体系中起到重要的作用，核磁共振能精确分析化合物的结构，在灵敏度测定过程中需要对分析药物的纯度进行掌握，在复杂生物样品测定阶段，按照信号测定要求进行。如果无法达到理想的纯度要求，会造成核磁共振信号严重重重，达不到理想的分析效果。色谱-核磁共振联用技术能实现复杂混合物的测定，原有的普通测试形式，会导致磁共振信号不完善，甚至出现进样量和流动时间不稳定的现象。在整个处理阶段，需要在现有仪器检查基础上进行，由于问题比较多，可能存在制约性的情况，可以采用核磁共振检测仪器，高分辨率和微线圈探头测试效果突出，能解决干扰问题。

四、毛细管电泳-质谱联用技术

毛细管电泳-质谱联用技术属于新型联用技术，其优势突出，在病症分析过程中，应用前景比较可观。毛细管电泳具备电泳和液相色谱的优势，和液相色谱形式相比，其灵敏度较高，根据扩散转移和质量转移要求可知，在灵敏度控制过程中需要对分辨率进行掌握，以样品和溶剂处理作为基础，按照质谱灵敏度以及组合要求实施。此外在弥补阶段，该技术形式能实现分离，因此广泛应用到药物活性分析中。

五、结语

现代的色谱联用技术日渐趋向于微量化、自动化、智能化，多种方法联用技术满足了药物实时、快速、在线、高通量分析的需要。当前，色谱联用技术已从药物质量的检测发展到疾病的诊断和治疗的应用，其适宜复杂样本中药物及相关产物的分析的特点，有望在生命科学、精准医学的研究发展中展露更多的优势。