1株解磷菌株鉴定及影响其解磷能力因素

高桂凤 党博 蔡柯 霍勤

(吉林农业科技学院，吉林，132101)

农业生产需要持续不断地投入磷，而现有磷储量有限，Gilbert[1]认为磷为一种正在消失的元素，因此活化土壤中大量的难溶性磷是解决我国磷素危机的重要途径。土壤中含有大量的溶磷微生物[2]，充分利用微生物来活化土壤中的磷素对提高植物对磷素吸收的效率和减少化学磷肥的投入具有重要意义。目前关于溶磷微生物活化土壤磷素的报道多是关于溶磷细菌的，溶磷真菌和溶磷放线菌的报道则较少；且大多数溶磷放线菌的报道是针对小单孢菌属(Micromonospora)和链霉菌属(Streptomyces)[3-5]。本研究对1株从盐碱土壤中分离到的解磷菌株进行了形态观察，以及16S rDNA鉴定，并研究了它的溶磷能力，为进一步应用研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

在碱性条件下，用NBRIP固体培养基从吉林省白城市通榆地区的次生盐碱土壤中分离出被试菌株。

无机磷培养基(NBRIP)[6]：葡萄糖10.00，MgCl2·6H2O 5.00 g，MgSO4·7H2O 0.25 g,(NH4)2SO40.10 g，KCl 0.20 g,FeSO4·7H2O 0.01 g，Ca3(PO4)25.00 g,去离子水1 L，pH=7.0～7.4。

高氏一号培养基[6]：KNO31.00 g，NaCl 0.50 g，MgSO4·7H2O 0.50 g，FeSO4·7H2O 0.01 g，K2HPO4·3H2O 0.50 g，可溶性淀粉20.00 g，去离子水1 L，pH=7.4～7.6。

1.2 试验方法

菌种的鉴定：对菌株进行菌落形态观察和个体微观形态显微观察；用细菌的通用引物克隆该菌株的16S rDNA，并送到北京华大基因股份公司测序，碱基序列在NCBI的BLASTn上进行比对，菌株的16S rDNA碱基序列与其他放线菌的碱基序列用MEGA-X软件构建系统进化树。

液体菌种的培养：取少量分离纯化的斜面菌种接种到100 mL高氏一号液体培养基中，30 ℃、160 r·min-1培养至对数生长期，备用。

碳源对解磷菌解磷量的影响：以NBRIP为基础培养基，在其他条……