紫草素对人白血病MV4-11细胞的增殖抑制和促凋亡作用

苏 龙，张云蔚，王 卓，宋 飞，秦田雪，高素君

(吉林大学第一医院肿瘤中心血液科，吉林 长春 130021)

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)患者FMS样酪氨酸激酶3受体基因内部串联重复序列(FMS-like tyrosine kinase-3 receptorinternal tandem duplication, FLT3-ITD)突变的发生率为20%～30%，FLT3-ITD突变AML危险分层属于高危组，预后不良[1-3]。微小RNA(microRNAs)在髓细胞分化和白血病发生中均发挥十分重要的作用，microRNA-155(miR-155)是AML的不良预后指标之一[4]。在FLT3-ITD突变AML患者中， miR-155表达明显上调[5]。有文献[6]报道：通过靶向药物干扰miR-155表达，可诱导白血病细胞凋亡且能够延长白血病小鼠的生存期。miR-155可能是FLT3-ITD突变AML的理想治疗靶点之一。尽管紫草素的抗肿瘤作用在实体肿瘤中被广泛报道，但有关其抗白血病作用的研究[7-9]较少。紫草素对FLT3-ITD突变AML是否有作用目前尚不清楚，且紫草素对miR-155表达是否有影响亦无文献报道。本研究采用人FLT3-ITD突变AML MV4-11细胞为研究对象，探讨紫草素对其增殖抑制和促凋亡作用，初步阐明其分子机制。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂和仪器 MV4-11细胞系购自中国科学院(上海)细胞库，培养于含10%胎牛血清(美国Gemini公司)和1%青霉素-链霉素的DMEM培养基(美国赛默飞世尔公司)中。紫草素购自上海纯优生物有限公司，采用二甲基亚砜(DMSO)溶解，配制成10 g·L-1储存液备用。CCK-8试剂盒(上海东仁化学科技有限公司)，Annexin Ⅴ-FITC/7-AAD试剂盒(美国BD公司)，RNAiso Plus试剂盒[宝生物(大连)有限公司]，miRcute miRNA提取分离试剂盒[天根生化科技(北京)有限公司]，Real-time PCR试剂盒(美国赛默飞世尔公司)。流式细胞仪(美国BD公司)，酶标仪(美国BioTek公司)，PCR仪(美国Bio-Rad公司)。

1.2 CCK-8法检测细胞增殖抑制率 采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率，具体操作参照试剂盒说明书进行。……