月季组培快繁技术研究

郑萍 徐厚刚 凌飞东 郑坤

摘   要：为了降低月季生产成本，提高其种苗质量和繁殖效率，达到生产与研究相结合的生产目标。以阜阳月季种质资源圃的月季作为此次研究对象，着重阐述了外植体选择与消毒、培养基和激素等选择对月季组织培养的影响，综合探讨分析月季组培快繁技术。

关键词：月季;组织培养;快繁技术

月季，学名Rosa chinensisJacq，原产于中国，它是一种常绿、半常绿低矮灌木，四季开花，花色主要有红色和粉色，白色和黄色较少，既可作为观赏植物，也可作为药用植物。主要种类有切花月季、食用玫瑰、藤本月季、地被月季等，花型较大，花开妍丽大气，具有浓郁香气，可广泛应用于园艺栽培和切花，其观赏性极强[1]。此外，月季花还具有较好的抗真菌及协同抗耐药真菌活性。其生长适应性较强，耐寒耐旱，对土壤没有过高的要求，但以富含有机质和排水良好的微带酸性的沙壤土为最佳。喜阳光，但过于强烈的阳光照射不利于花蕾的发育，容易导致花瓣焦枯，因此，喜阳光但要避免长时间的强光直射。喜温暖，一般最佳生长温度在22～25℃之间，过高的温度会影响开花，因此，在夏季高温时节，月季开花状态不佳，花开品质降低。在培植过程中，空气相对湿度最好维持在80%，要保持空气流通无污染，若通气不良容易形成白粉病。目前，主要栽培方法有扦插繁殖法、嫁接繁育技术等，但由于我国月季组织培养技术起步较晚，尽管发展至今其技术已经和国外差距不明显，但在繁殖培育上还有所欠缺，通过相关研究，组织培养和快速繁育技术广泛应用于月季的培植中，可以提升经济效益和生态效益[2]。通过对月季组培快繁技术进行研究，试图找出最优的培育方法，以期为后期月季大规模的繁育提供技术支撑。

1     材料和方法

1.1   材料

选取阜阳月季种质资源圃的月季作为此次研究对象。

1.2   方法

从选取的月季盆栽植株上，选择当年生的月季枝条，用饱满而未萌发的腋芽茎段作为外植体，腋芽茎段要以当年生枝条中段最佳。将选取的枝条去叶，并且将附在茎上的叶柄及皮刺剥离，再将其切成2～3cm的小段，每个小段上都保留一个侧芽，在洗衣粉溶液中浸泡1min，之后使用清水将其洗净并用滤纸将水渍吸干。然后，在无菌环境中，用75%的酒精对其进行30s的消毒处理，再用无菌水进行冲洗，之后再在1%次氯酸钠溶液中浸泡6min，然后在使用0.10%升汞溶液浸泡5min，最后再次使用无菌水进行冲洗，用解剖刀切去茎段的毒害部分，将其接种在不同的芽分化培养土中。

一般在接种5d，茎段中部就会产生萌芽，而在12d，基部和梢部的萌芽才会产生，从萌芽到芽生长到1cm这个阶段需要持续2～3周。以MS作为基本培养基，其蔗糖成分在3%～5%，琼脂在0.10%，外加不同的激素，每瓶接种茎段5个。在光照培养箱内进行培养，培养温度维持在22～25℃，光照时间调节至12～15h/d，光照强度则维持在1500～1800Lx之间，pH值保持在5.8～6.0最佳。在诱导芽分化后，继续进行继代培养，使其不断增殖，当增殖倍数达到一定程度后，将“丛生芽”切下转入到MS+BA0.30 mg/L +NAA0.30 mg/L的培养基上，让小芽继续生长，待芽生长至3cm，将小苗切下，之后移植到生根培养基中。

2     结果与分析

2.1   影响月季诱导丛生芽的因素分析

腋芽在茎段上的位置对诱导丛生芽的影响。经过研究，通过对位于不同位置的腋芽茎段在无激素的MS基本培养基上的培植情况观察，在培育15d，枝条顶端和基部的芽发育最缓慢，中间段的芽发育则较快，由此可见，中间部位的茎段诱导芽是最佳培植选择。

茎段长度对形成多芽苗的影响。通过对不同长度的茎段在诱导培养基中的培植效果观察，茎段长度在1～8cm时，其形成多芽苗的效果最佳。这样的切割长度能够使每个茎段的侧指数减少。若茎段切割过长或过短都会对芽的诱导产生不利影响，都不利于多芽苗的形成。

2.2   影响月季芽的分化和生长的因素分析

2.2.1   侧芽诱导的分化结果。将月季的茎段接种在不同激素的培养基上时，通常1周后侧芽就会发生膨大现象，在10d就可逐渐分化形成幼苗，从本次诱导分化试验的结果分析得知，在MS+6-BA3.00mg/L+NAA0.30mg/L培养基上的分化率最高，这说明了在6-BA浓度较高时比较容易诱导侧芽的分化，从6-BA3.00mg/L的浓度水平下芽的分化率和质量来看，这种浓度被认为最适宜腋芽诱导。增加一定浓度的NAA有利于离体侧芽的分化，但浓度不宜过高，否则抑制侧芽的分化符合生长。由此可知，最适宜月季侧芽分化的培养基是MS+6-BA3.00mg/L+NAA0.10～1.00mg/L。（详情见表1）

2.2.2    6-BA浓度及BA与IAA、NAA和IBA配合对芽长势的影响。通过试验分析，芽的生长会随着6-BA浓度的增加而不断下降，芽的玻璃化现象也会逐渐加重，通过这个生芽试验证明了，具有细胞分裂素活性的6-BA能够有效地促进诱导芽萌发，而生长素和细胞分裂素的适当配比可以对月季的分化增殖产生很大的影响，由试验结果可知，培养基配方是MS+6-BA3.00mg/L+NAA 0.20mg/L时最适宜芽的生长，（详情见表2）。

2.3  影响月季生根的因素分析

2.3.1 MS无机盐和不同浓度培养基对月季生根培养的影响。当月季嫩芽生长到一定长度时，接种到1/2MS+IBA和1/2MS+NAA  2种培养基上，经过20d的培养后，1/2MS+IBA培养基的生根率在75%，每株发根1～3根，1/2MS+NAA培养基附加NAA0.20-1.00可诱导不定根的产生，生根率可达83.30%～93.30%，且在附加NAA浓度为0.50mg/L的生根效果最佳，根系生长最良好，由试验结果可知，低浓度的生长素比较有助于根的生长，适当浓度的IBA和IAA可以对生根率产生明显的影响，但浓度过高会抑制生根，最佳生长素浓度应在0.20～1.00mg/L之间，只有在这样的浓度配比下才能促进生根，加速苗生长。（详情见表3）

2.3.2 活性炭对月季生根的影响。通过研究发现，在月季组培过程中，在生根培养期间，加入适量的活性炭有利于增强生根效果，活性炭的使用可以有效吸附酶类物质[3]，可以在生根培育中减少褐变情况的发生。

3     结论

综上所述，通过侧芽诱导的分化结果显示，最适宜月季侧芽分化的培养基是MS+6-BA3.00mg/L+NAA0.10～1.00mg/L，培养基配方是MS+6-BA3.00mg/L+NAA 0.20mg/L时最适宜芽的生长;通过对MS无机盐和不同浓度培养基对月季生根培养的影响试验分析，生根培养基为1/2MS+IBA0.50mg/L和1/2MS+NAA0.05mg/L最佳，最佳生长素浓度应在0.20～1.00mg/L之间，只有在這样的浓度配比下才能促进生根，加速苗生长。

参考文献

[1]徐蕊.花月季组培快繁技术研究[J].农村科学实验，2019（5）

[2]王镭，张英杰，张京伟，等.月季组培快繁技术研究进展[J].黑龙江农业科学，2019（6）

[3]于非，王禹，张毓.月季组织培养快繁体系的建立[J].中国林副特产，2017（2）

（责任编辑   禾初）