猴头菇菌丝体蛋白制备工艺研究

刘广建 郑惠华 蒋 益 桑 花 薛 璟 季宏更 张 蕾

（1江苏省苏微微生物研究有限公司，江苏无锡214063；2江苏安惠生物科技有限公司，江苏南通226009）

猴头菇是一种营养价值极高的食用药用真菌，含有丰富的多糖、多肽、萜类、甾醇类等活性成分，具有抗肿瘤，降血糖，降血脂等诸多功效。现代研究表明猴头菇活性蛋白具有免疫调节作用，活性肽则有抗氧化功效。猴头菇的多肽组合物可以改善老年痴呆小鼠的学习能力。Chen Diling等采用化学分离结合药效学评估方法，从猴头菇中分离单带蛋白（HEP3）。该蛋白通过调节肠道微生物群落的组成和代谢来改善免疫系统，激活T细胞的增殖和分化。辅助试验还表明，HEP3可作为肿瘤负荷小鼠的抗肿瘤免疫抑制剂。近些年来随着人们养生意识的提高，猴头菇也因此成了国内外极力追捧的明星级食药用菌。试验以猴头菇菌丝体为原料，对菌丝体蛋白的多种提取工艺进行优化，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法测定其分子量分布，为猴头菇菌丝体蛋白和多肽的进一步研究和开发提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 供试材料

猴头菇菌丝体由液体发酵所得，经测定蛋白质含量35.2%；考马斯亮蓝G250、R250（分析纯）、牛血清蛋白（分析纯）、三羟甲基氨基甲烷（Tris）、N，N，N，N-四甲基乙二胺（TEMED）、木瓜蛋白酶（为国药集团化学试剂有限公司生产）；蛋白质marker（8～180 kD）、SephadexG-100（为常州天地人和生物科技有限公司生产）；其余试剂均为市售分析纯。

仪器设备：Alpha-1500型紫外可见分光光度计（上海谱元仪器有限公司生产）；……