灵芝番茄胶囊工艺研发及增强免疫力功能试验研究

宋小飞 麻开香 田密

摘要 [目的]灵芝番茄胶囊的工艺开发及增强免疫力的功能评价。[方法]分别测定不同混合时间对牛磺酸含量的影响，确定最佳混合时间，测定混合物的休止角、堆密度、吸湿率和相对吸湿率，确定最佳的生产工艺。分别以0.27、0.53和0.80 g/kg（分别相当于本品人群推荐剂量的10、20、30倍）的剂量连续给小鼠灌胃30 d，检验其对小鼠免疫力的影响。[结果]灵芝番茄胶囊的最佳生产工艺为混合时间30 min，物料混合及生产过程中湿度应小于65%。灵芝番茄胶囊高剂量组能显著增强小鼠Con A诱导的脾淋巴细胞增殖能力;高剂量组能显著增强小鼠对DNFB诱发的DTH反应;中剂量组能显著提高小鼠抗体生成细胞的数量;中剂量组能显著升高小鼠血清溶血素含量;低、高剂量组能显著提高小鼠碳廓清吞噬指数;低剂量组能显著提高小鼠吞噬百分率和小鼠吞噬指数。[结论]灵芝番茄胶囊具有增强免疫力的功能。

关键词 灵芝番茄胶囊;工艺研发;增强免疫力

中图分类号 R285.5 文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2020）03-0178-04

Abstract [Objective]The technology of Lingzhifanqie capsule was developed and its immunity enhancement function to be assessed.[Method]The effects of different mixing time on the determination of taurine were determined.The best production process was determined by the angle of repose，bulk density，moisture absorption rate and relative moisture absorption rate of the mixture.The mice were given 0.27，0.53 and 0.80 g/kg （10，20，30 times the recommended dose of the population respectively） for 30 days to test their effects on the immunity of mice.[Result]The optimum production technology of Lingzhifanqie capsule was 30 minutes of mixing time，and the humidity during mixing and production should be less than 65%.The high dose group of Lingzhifanqie capsule can significantly enhance the proliferation of spleen lymphocyte induced by Con A in mice; the high dose group can significantly enhance the DTH response induced by DNFB in mice; the middle dose group can significantly increase the number of antibodyproducing cells in mice; the middle dose group can significantly increase the content of serum hemolysin in mice; the low and high dose groups can significantly increase the number of antibodyproducing cells in mice.The carbon clearance phagocytosis index of mice was increased，and the phagocytosis percentage of mice and the phagocytosis index of mice were increased significantly in the low dose group.[Conclusion]Lingzhifanqie capsule has the function of enhancing immunity.

Key words Lingzhifanqie capsule;Technological research and development;Enhancing immunity

灵芝番茄胶囊是以灵芝提取物、番茄提取物、牛磺酸、维生素E为主要原料制成的保健食品，主要用于增强免疫力。灵芝性温，味淡。《本草纲目》记载灵芝具有“治胸中结，溢心气”“入心生血，助心充脉”等功效，对全身五脏之气均有补益作用。现代药理学研究表明，灵芝含多糖、三萜类、氨基酸等多种成分，具有增强免疫力的保健功效[1-2]。番茄提取物是从天然植物番茄中经提取精制而成，其活性成分主要为番茄红素，现代药理学研究表明，番茄红素具有很好的抗氧化[3]和增强免疫力功能[4]。牛磺酸为人体的条件必需氨基酸。研究发现，牛磺酸是调节机体正常生理活动的活性物质，具有消炎[5]、鎮痛[6]、提高机体免疫能力[7]等功能。维生素E具有促进动物生殖，维持中枢神经系统、心血管系统和骨骼肌的正常功能的作用。近年来研究表明，维生素E能通过增强体液免疫[8]，提高细胞介导的免疫应答，影响吞噬细胞功能[9]等作用而提高机体免疫状态。笔者对灵芝番茄胶囊的制备工艺进行研究，评价灵芝番茄胶囊增强免疫力的功能。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 研究对象。灵芝提取物，西安三江生物工程有限公司;牛磺酸，潜江药业股份有限公司;维生素E，浙江新和成股份有限公司;番茄提取物，陕西中鑫生物技术有限公司;糊精，安徽山河药用辅料股份有限公司;硬脂酸镁，安徽山河药用辅料股份有限公司。

1.1.2 动物。

SPF级昆明种雌性小鼠（18～22 g，200只），由湖北省实验动物研究中心提供，生产许可证号：SCXK（鄂）2008-0005，使用许可证号：SYXK（鄂）2012-0065號。

1.2 方法

1.2.1 工艺研究方法。灵芝番茄胶囊制备过程主要包括物料的混合、填充、抛光等基本工艺。对物料的混合时间、粉体的流动性、吸湿率进行相关参数的考察确定其最佳的生产工艺。

在25 ℃、相对湿度75%的条件下放置物料，定时称量，直至吸湿平衡为止。按下式计算吸湿百分率：吸湿百分率=（吸湿后重量-吸湿前重量）/吸湿前重量×100%。

1.2.2 动物试验方法。按灵芝番茄胶囊人群推荐日摄入量0.027 g/kg扩大10、20、30倍设置低、中、高3个计量组，即0.27、0.53、0.80 g/kg，共分5个试验组，每个试验组包括阴性对照组、低、中、高剂量组，各剂量组试验动物为10只。免疫试验一组进行迟发性变态反应试验;免疫试验二组进行Con A诱导的小鼠淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定;免疫试验三组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验;免疫试验四组进行血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测;免疫试验五组进行淋巴器官/体重比值和碳廓清试验。小鼠连续灌胃30 d后开始试验。各试验组小鼠均按0.02 mL/g容量经口灌胃试验。

2 结果与分析

2.1 工艺研究

2.1.1 混合时间对混合均匀性的影响。

由于配方中各原料配方量相差不大，灵芝提取物、牛磺酸、维生素E粉、番茄提取物、糊精可直接混合即可，在混合过程中分别在第20分钟、第25分钟、第30分钟、第35分钟时间点分别随机不同位置取样（3份），检测样品中牛磺酸含量，计算3份样品中牛磺酸含量的相对标准偏差。

从表1可以看出，混合粉混合30 min后，牛磺酸成分含量的RSD<3%，35 min后指标成分含量RSD虽小于30 min后的指标含量，但考虑到实际生产过程中的能耗，因此确定混合粉混合时间30 min较为合理。

2.1.2 粉体的流动性研究。

混合粉是否可以直接灌装胶囊取决于混合粉的流动性，因此，对混合粉的流动性进行考察，测定其堆密度，根据灵芝番茄胶囊的人群推荐服用量确定胶囊壳的规格。

测定3次灵芝番茄胶囊混合粉的休止角为38.7°、381°、38.2°，平均休止角较小（低于40°），说明其流动性较好，可适合直接填充胶囊。根据测定的堆密度结果（表2）可知，混合粉平均堆密度约为0.656 g/mL，根据灵芝番茄胶囊日服用量确定每粒装量为0.4 g，胶囊型号确定为0#空心胶囊。

2.1.3 吸湿率测定。物料的吸湿性对实际生产过程中有重要的影响，决定了生产过程的温湿度控制和制剂过程的时间控制。取适量灵芝番茄胶囊混合粉放置在25 ℃、相对湿度75%的条件下，定时称量，测定吸湿百分率。从图1可以看出，在相对湿度为75%的条件下，灵芝番茄胶囊混合粉的吸湿率在24 h内吸湿较快，24 h后吸湿率接近平衡，因此在制剂过程中灵芝番茄胶囊混合粉不易在环境中暴露时间过长，最好控制在8 h以内。

2.2 保健功能评价

2.2.1 灵芝番茄胶囊对小鼠迟发性变态反应的影响。从表3可以看出，与阴性对照组相比，低剂量组与中剂量组的Con A 诱导脾淋巴细胞增殖OD差值和DNFB诱导DTH左右耳重量差无显著性差异，而高剂量组能显著增强小鼠DNFB诱发的DTH反应（P<0.05）。

2.2.2 灵芝番茄胶囊对小鼠抗体生成细胞检测的影响。从表4可以看出，与阴性对照组相比，低剂量组与高剂量组的溶血空斑数无显著性差异，而中剂量组能显著增强小鼠的溶血空斑数（P<0.05），即中剂量组能显著提高小鼠抗体生成细胞的数量。

2.2.3 灵芝番茄胶囊对小鼠血清溶血素滴度水平的影响。从表5可以看出，与阴性对照组相比，低剂量组与高剂量组的血清溶血数无显著性差异，而中剂量组能显著增强小鼠的血清溶血数（P<0.05）。

2.2.4 灵芝番茄胶囊对小鼠碳廓清功能的影响。从表6可以看出，与阴性对照组相比，中剂量组的小鼠碳廓清吞噬指数无显著性差异，而低剂量组和高剂量组能显著增强小鼠的碳廓清吞噬指数（P<0.05）。

2.2.5 灵芝番茄胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的影响。从表7可以看出，与阴性对照组相比，中剂量组与高剂量组的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数无显著性差异，而低剂量组能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数（P<0.05）。

2.2.6 灵芝番茄胶囊对小鼠NK细胞活性的影响。从表8可以看出，与阴性对照组相比，低、中、高剂量组对小鼠的NK细胞活性无显著性差异（P<0.05）。

3 结论与讨论

灵芝番茄胶囊是以灵芝提取物、番茄提取物、牛磺酸、维生素E为主要原料制备而成，其中灵芝提取物具有益气血、安心神健脾胃[10]、止咳平喘的功能[11]。番茄提取物有抗氧化效果，具有提高人体的应激能力，进而达到提高机体免疫作用;牛磺酸、维生素E属于营养强化剂，能改善、提高机体的免疫状态。从中医理论方面讲，上述原料皆具有扶正之功，即具有增强免疫力功能，而现代药理研究也证明上述原料均具有增强免疫力功能。

灵芝提取物、番茄提取物、牛磺酸、维生素E可以经混合后直接填充胶囊，最佳混合时间为30 min，选用0#胶囊作为胶囊规格，物料混合及生产过程中湿度应小于65%，制剂过程应控制在8 h以内。

从灵芝番茄胶囊的功能性试验结果可以看出，高剂量组能显著增强小鼠Con A诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小鼠对DNFB诱发的DTH反应;中剂量组能显著提高小鼠抗体生成细胞的数量;中剂量组能显著升高小鼠血清溶血素含量;低、高劑量组能显著提高小鼠碳廓清吞噬指数;低剂量组能显著提高小鼠吞噬百分率和小鼠吞噬指数;各剂量组均不能显著性增强小鼠NK细胞活性。综上所述，该胶囊具有增强免疫力的保健功能。以中医理论为基础，结合现代药理研究，制备的灵芝番茄胶囊具有制备工艺简单、增强免疫力保健功能确切的优势，具有广泛的应用前景。

参考文献

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