彝族药白草莓抗胃炎有效部位筛选及药效学研究

2020-04-10 06:47李海艳
健康大视野 2020年6期
关键词:慢性胃炎抗菌

李海艳

【摘 要】本实验选用彝药白草莓萃取5个有效部位进行幽门螺旋杆菌的体外抗菌实验,测定各部位的最小抑菌浓度(MIC),结果石油醚部的MIC为281.25?g.ml-1,二氯甲烷部的MIC为1125?g.ml-1,乙酸乙酯部的MIC为35.16?g.ml-1,正丁醇部的MIC为562.5?g.ml-1,水层的MIC为17.5?g.ml-1,对照药克拉霉素的MIC为0.0075?g.ml-1,其中水层的抗菌活性最强,验证了白草莓用于治疗慢性胃炎的民间验方的科学性。

【关键词】白草莓;慢性胃炎;有效部位;抗菌

【中图分类号】R29【文献标识码】A【文章编号】1005-0019(2020)06--02

白草莓为蔷薇科草莓属Fragaria植物黄毛草莓的干燥全草,白草莓(云南中草药选),异名白泡儿、白蒲草、白地莓等,又名:锈毛草莓(秦岭植物志)[1]。多年生草本,粗壮,密集成丛,高5-25cm,茎密被黄棕色柔毛,几与叶等长。药味甘、苦,性凉。主治肺热咳喘,解毒消肿,百日咳,口舌生疮,痢疾,小便淋痛,蛇毒咬伤,骨折损伤[2-3]。《云南中草药》记载主治口腔溃疡,血尿,尿路感染,腰椎结核,骨折。其具有较高的药用价值,资源丰富,但目前对其药效研究较少,但为民间验方常用药。本文根据民间用其治疗顽固性慢性胃痛立题,慢性胃炎为临床常见疾病及多发疾病,临床表现症状较多表现为上腹部疼痛或饱胀、恶心、嗳气等,随着病情的发展会发生上皮分化致腺体萎缩,进而发展成胃癌。选取慢性胃炎的主要致病菌幽门螺旋杆菌做体外抗菌实验,确定药材不同有效部位的最小抑菌浓度,为今后用民族药预防、治疗慢性胃炎提供有力依据。

1 实验材料及仪器

1.1 材料

1.1.1 药材 采自云南省玉溪市江川区,经中国科学院昆明植物研究所鉴定为蔷薇科草莓属(Fragaria)植物黄毛草莓的全草。

1.1.2 菌种 幽门螺旋杆菌(H.pylori)标准菌株ATCC11637,由云南省楚雄州药检所微生物实验室提供。

1.1.3 培养基及培养条件 选用脑心浸液肉汤(BHI)培养基,美国Sigma公司,加入10%的无菌脱纤维兔血,加入联合抗生素Timp 5mg/L,万古霉素5mg/L,两性霉素2mg/L,制成选择性血试管备用。菌株经过活化、接种后,将试管置于含5% CO2 37℃条件培养3—5天,选择阳性者用于实验。

1.2 样品提取 白草莓药材5kg用8倍量70%乙醇回流提取3次混合得2500ml为总提物,用极性从小到大的5种溶剂顺序萃取,得有机溶剂部分和水层部分,后者再用其2倍量的有机溶剂萃取两次,即得石油醚萃取部(30.075g)、二氯甲烷萃部(109.342g)、乙酸乙酯萃部(126.032g)、正丁醇萃取部(155,320g)、剩余水层(184.721g)、对照药品为克拉霉素(幽门螺旋杆菌的特效药)。

2 试验方法

2.1 样品稀释方法 采用二倍稀释法[6-8]:取无菌试管11支,每支加BHT培养基2ml,第1管加入抗菌药2ml,从第1支管取2ml至第2管,混匀。依次取至第9管,第9管取2ml弃去。第10管不加抗菌药为阳性对照管,第11支管加受试药不菌液为阴性对照管,混匀后去2ml弃去,1—10管加100 ?L菌液。菌液用0.5号麦氏比浊管比浊,将其浓度调至4×105—5×105 cfu.ml-1之间。第1管至第9管中的药物终浓度由高到低为:3000、1500、750、375、187.5、93.75、46.88、23.44、11.72 ?g.ml-1,克林霉素浓度由高向低依次为0.64、0.32、0.16、0.08、0.04、0.02、0.01、0.005、0.0025 ?g.ml-1。

2.2 试验结果观察标准 幽门螺旋杆菌接种后置于37℃,5% CO2 条件顶微需氧环境中培养3—5天,读取MIC值,以无菌生长的试管中所含药物最低浓度为药物对该菌的最低抑菌浓度。

3 结果

4 讨论

本实验提取彝族药白草莓经石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水层萃取所得的不同有效部位进行慢性胃炎的主要致病菌幽门螺旋杆菌的体外抗菌研究,选用克拉霉素为对照抗菌药。结果显示白草莓石油醚萃取物对致病菌的MIC均数为281.25 ?g.ml-1、二氯甲烷的MIC均数为1125 ?g.ml-1、乙酸乙酯的MIC均数为35.16 ?g.ml-1、正丁醇的MIC均数为562.5 ?g.ml-1 、水层的MIC均数为17.5 ?g.ml-1,克拉霉素的MIC均数为0.0075 ?g.ml-1。其中白草莓水层的抗菌活性最强,其次是乙酸乙酯萃取部位效果也较好。本实验结果为今后于民族药中筛选出治疗慢性胃炎特效药提供有力依据,同时也证明本实验选用的彝药白草莓在民间长期用于预防、治疗慢性胃炎是科学的、合理的。

参考文献

王丽,李学芳.白草莓的生药学研究[J].云南中医学院学报,2011,34(5):11-14.

江紀武,靳朝东.药用植物词典[M].天津:天津科技出版社,2005:335.

国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(第4卷)[M].上海:上海科技出版社,1999:149.

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