贺韵涵,李晓峰,符 涛,杨晓航,戚莹媛,王 强,4△
1.陕西中医药大学(咸阳712046);2.北京崇文光明医院保健科(北京100061);3.陕西中医药大学第二附属医院(咸阳712000);4.陕西省针药结合重点实验室(咸阳712046)
肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophiclateral sclerosis,ALS)是一种中枢神经系统退行性疾病。主要表现为全身肌肉渐进性无力、萎缩、肌肉痉挛等,最终多因呼吸麻痹致死[1]。目前该病主要依靠药物利鲁唑(Riluzole)治疗,但其副作用大,经济成本高,因此迫切的需要寻找一种安全、有效、经济的方法。近年来研究发现[2],针灸在治疗神经元退行性疾病中发挥了一定的作用。而针刺治疗ALS 的作用机制却鲜有报道。本研究选择电针刺激双侧天枢穴及足三里穴作为针刺治疗组。再通过对比正常组、模型组、针刺组及利鲁唑组之间IBA-1 及TNF-α 表达的差异,观察电针对IBA-1及TNF-α表达水平的影响,探讨针刺治疗该病的临床价值及作用机制。
1 材 料
1.1 实验动物及分组:SOD1G93A转基因小鼠由Jackson 实验室购买。将18 d小鼠剪尾0.3-0.5 cm,依照Jackson实验室的方法进行基因鉴定。应用PCR技术鉴定子代鼠,符合SOD1G93A基因表型为模型鼠,不符合为正常组,将模型鼠再分为模型组、针刺组、利鲁唑组,每组各8-10 只。实验室喂养条件为(24±2)℃,光照12 h及黑暗12 h交替,定时给予清洁饮水及饲料。实验过程对SOD1G93A转基因小鼠处理,严格遵循国家科技部2006年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》。
1.2 主要试剂及仪器:利鲁唑(法国,赛诺菲);兔抗IBA-1 和TNF-α(英国,ABCAM);即用型SABC(兔IgG)试剂盒(武汉,博士德);DAB 显色液(武汉,博士德);冰冻切片机(美国,Thermo Scientific,型号HM525 NX);显微摄像成像系统(德国,Leica,型号THUNDER Imager Tissue)。……