大豆GmWRKY86基因的克隆及表达

王 静 付 晶 李晓伟

(1. 沧州职业技术学院，河北 沧州 061001；2. 河北大学，河北 保定 071002)

WRKY基因家族是高等植物最大的转录因子家族之一。1994年Ishiguro等[1]从甘薯中克隆了第一个WRKY蛋白，近年来随着越来越多植物基因组的公布，不同物种间大量的WRKY成员在相继得到克隆和鉴定[2]。WRKY基因编码的蛋白除了WRKYGQK核心序列外，还存在保守的锌指结构[2]。依据WRKY蛋白结构域及锌指基序数量和模式的不同，WRKY蛋白分为3个亚类，其中第Ⅰ类含有两个WRKY结构域，第Ⅱ类和第Ⅲ类虽只含有一个WRKY结构域，但第Ⅱ类的锌指结构模式为C2H2，而第Ⅱ类的锌指结构模式为C2HC[3]。

作为重要的转录因子成员，植物WRKY蛋白已被证明参与对生物和非生物胁迫的响应以及发育过程[3]。有研究表明，WRKY蛋白不仅在抵抗细菌、真菌和病毒病原体等生物胁迫过程中发挥重要作用[4-5]，还广泛参与了胚发生[6]、衰老[7]、休眠[8]、毛状体发育[9]、种子发育[10]等过程，以及由植物激素如赤霉酸[11]、脱落酸(ABA)[12]或水杨酸[13]介导的一些信号转导过程。同时，有证据[14]表明WRKY蛋白参与了对各种非生物胁迫的响应。在拟南芥中过表达AtWRKY28蛋白可提高植物对多种非生物胁迫的抵抗力[15]；在水稻中过表达来自玉米的ZmWRKY114蛋白可提高阳性植株对盐胁迫的耐受性；在水稻中过表达OsWRKY42蛋白虽然对生物胁迫无效果，但显著延缓胼胝质降解并增强对盐胁迫的耐受性[16-17]。

虽然植物WRKY蛋白的研究已取得了很大的进展，但对这个重要的转录调节家族的了解仍然有限。大豆是重要的农作物，是人类植物蛋白质、食用油和其他有益于健康的营养物质的主要来源[18]。……