减蛋综合征病毒（EDS76）的分离和鉴定

王丹丹

（哈药集团生物疫苗有限公司，哈尔滨 150227）

减蛋综合征76（EDS76）是由减蛋综合征病毒（EDS76V）引起的鸡的重要病毒病之一，可引起产蛋鸡的产蛋量降低和产蛋品质下降。该病已在世界范围内的许多国家流行，成为引起产蛋损失的主要疫病之一[1-2]。EDS76V可使鸡产蛋率下降10%～30%，甚至高达41%，蛋的破损率达38%～40%，无壳蛋、软壳蛋达15%，给养禽业造成严重的经济损失，1976年Yan首次分离到鸡减蛋综合征病毒（EDS76V）[3-4]。我国于20世纪80年代末在肉用种鸡群中发现减蛋综合征以来，相继分离到许多株EDS76V病毒[5-7]。2005年黑龙江省绥化市1个体养鸡场的190日龄商品蛋鸡突然出现产蛋下降，产蛋率由95.4%下降到72.5%，蛋壳颜色变浅，并出现大量的弱壳蛋、无壳蛋、沙壳蛋和畸形蛋；除了表现产蛋下降，并无其他明显的临床症状，初步怀疑为减蛋综合征。采集发病鸡的输卵管，用鸭胚进行病毒分离，分离到一株具有血凝性病毒，经一系列鉴定，确定为EDS76V，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

鸭胚：9～10日龄鸭胚，从无减蛋综合征感染的鸭场购买鸭蛋，自行孵化。病毒阳性血清：新城疫病毒（NDV）和减蛋综合征病毒（EDS76V）阳性血清购自中国兽药监察所，由实验室保存。

1.2 病毒分离

1.2.1 病料采集和处理

取产软壳蛋和无壳蛋、初步怀疑感染减蛋综合征病毒的鸡，剖杀，取输卵管的狭部，用研钵研磨，加入PBS液制成悬液，反复冻融3次，3 000 r·min-1离心10 min，吸取上清，按每毫升液体加入青霉素2 000 U、链霉素2 000 μg，4℃放置4 h，取上清，作为鸭胚接种材料。

1.2.2 样品接种

将处理好的病料，经尿囊腔分别接种10日龄鸭胚，0.2 mL·胚-1，每个样品接种5枚，置37℃孵育观察。……