骨桥蛋白介导PI3K/AKT通路促进非小细胞肺癌顺铂耐药*

刘 迪, 龙 谦，罗 猛，胡 剑，陈 臣，裴登科

贵州省人民医院胸外科,贵阳 550002

肺癌是来源于支气管黏膜上皮的恶性肿瘤，非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)，约占全部肺癌的85%左右[1]。尽管近年来NSCLC的靶向治疗取得了很大进步，但以含铂药物为主的联合化疗仍然是中晚期NSCLC的主要治疗手段[2]，然而，由于肿瘤对铂类等化疗药物产生耐药，NSCLC患者5年总生存率不超过15%[3]。

NSCLC对顺铂耐药的具体机制目前尚不十分明确。PI3K/AKT信号转导通路的过度激活，可导致NSCLC对抗化疗药物诱导的肿瘤细胞凋亡作用，从而产生耐药效应[4]。此外，ERK1/2信号通路可介导抗凋亡作用[5]，从而在以铂类药物为主的肿瘤耐药发展过程中起到至关重要的作用[6]。顺铂造成的DNA损伤，可通过核苷酸切除修复途径来修复，而切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementation group 1，ERCC1)是DNA修复系统中的一个关键基因，Newton等[7]研究发现ERCC1的过表达与NSCLC的顺铂耐药有关。

骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种分泌型磷酸化糖蛋白，OPN通过激活肿瘤细胞中PI3K/AKT和ERK1/2信号通路上调NF-κB的表达，促进肿瘤细胞侵袭、生长与转移[8]。目前尚不清楚OPN是否参与调控NSCLC对顺铂的耐药。此外，ERCC1的表达受内源和外源的多种因素影响，OPN是否能通过上调ERCC1基因的表达而增加NSCLC对顺铂的耐药值得进一步研究。本研究选用NSCLC A549细胞系，构建OPN过表达细胞及OPN沉默细胞，探讨OPN是否能够通过PI3K/AKT及ERK1/2信号通路促进NSCLC对顺铂的耐药。

1 材料与方法

1.1 实验材料

NSCLC A549细胞购于中科院上海细胞库，胎牛血清购自美国BI公司，Opti-MEM培养液购自美国Gibco公司，U0126购自美国MedChem Express公司，LY294002购自美国Sigma公司，循环测……