高效液相色谱/蒸发光散射法测定多黏菌素类原料药中主成分含量

彭侃霖，宋旭琴，刘 戎，张嘉慧，周 豪，丘镜莉，贺利民

(华南农业大学 兽医学院药理研究室，广东 广州 510642)

多黏菌素类(Polymyxins)药物是从多黏芽孢杆菌(Bacilluspolymyxa)中提取的非核糖体途径合成的环多肽类抗生素，主要包括A、B、C、D和E等品种[1]。其中，多黏菌素B主要成分为多黏菌素B1和B2；多黏菌素E(Colistin，又称克利斯汀)主要成分为多黏菌素E1和E2(图1)。多黏菌素类抗生素对革兰氏阴性杆菌(如大肠杆菌、肺炎杆菌、绿脓杆菌等)具有较强的抗菌作用，如多黏菌素E作为兽药广泛应用于治疗呼吸道、肠道和泌尿系统感染等疾病[2]。此外，多黏菌素E还具有提高饲料转化率，促进动物生长的作用，曾被农业部列为可在牛、猪和鸡饲料中添加使用的药物添加剂[3]。但其在畜牧业生产中的广泛、大量和长期使用，不仅具有潜在肾毒性及神经毒性作用，还会增大细菌耐药性风险，危害人类健康[4-6]。为此，我国农业农村部第2428号公告明确规定停止多黏菌素E用于动物促生长，但保留其在动物中的药用功能[7]。

图1 多黏菌素B和多黏菌素E的结构式
Fig.1 Chemical structures of polymyxin B and polymyxin E

多黏菌素B和E均由相应生产菌发酵后提取制备，组分复杂，对其产品质量保证和控制具有较高要求。目前，饲料及饲料添加剂中多黏菌素B和E的检测主要有微生物检测法[8]、毛细管电泳法[9]及高效液相色谱法[10](High performance liquid chromatography，HPLC)。《中华人民共和国药典》2015年版[11]则采用抗生素微生物检定法，但其操作步骤多，环境洁净度要求较高，且测定结果重复性差[12]，难以体现实际效价。朱曦等[13]建立了高效液相色谱/紫外……