钟 晨 张丽翠 朱美意 (石河子大学医学院第一附属医院普外三科,石河子 832000)
胃癌分子发生机制十分复杂,其与胃癌中异常表达的基因有关,这些基因参与调控胃癌细胞恶性转移,研究胃癌分子发生机制对于胃癌的治疗具有重要意义[1]。IL-17是一种促炎因子,其由多种细胞分泌,在肿瘤进展中发挥关键作用[2]。研究显示,IL-17在肿瘤患者中高表达,IL-17促进肿瘤细胞恶性转移,IL-17是构成肿瘤微环境的重要组成部分[3]。miRNA与细胞的生长、运动以及组织代谢等有关,是一个多功能非编码RNA[4]。miRNA还与肿瘤的发生有关,其在肿瘤组织中异常表达往往与肿瘤患者的淋巴结转移、病理分期等密切相关[5]。miR-195-5p属于miR-15家族,其在多数肿瘤组织中起到抑癌基因的作用,对于骨肉瘤、肺癌、胃癌等肿瘤细胞的侵袭和迁移能力具有抑制作用[6-8]。研究报道显示,miR-195-5p参与IL-17促进子宫内膜癌细胞转移过程,IL-17可以诱导子宫内膜癌细胞中miR-195-5p表达下调[9]。本次实验以胃癌细胞AGS为研究对象,探讨miR-195-5p在IL-17诱导的胃癌细胞侵袭和迁移中的作用和靶向调控机制,以期为胃癌的治疗提供潜在靶点,为研究胃癌分子发生机制提供参考。
1.1材料 胃癌细胞AGS购自南京科佰生物科技有限公司;IL-17购自碧云天生物技术研究所;mimics control、miR-195-5p mimics由上海吉玛制药技术有限公司合成;Vimentin抗体购自美国Santa Cruz Biotechnology公司;Lipofectamin 2000、吞噬细胞运动蛋白2(engulfment and cell motility 2,ELMO2)抗体购自美国invitrogen公司;E-cadherin抗体购自美国 Cell Signaling Technology公司;引物由北京优博兰基因技术有限公司合成;pcDNA3.1-ELMO2、pcDNA3.1购自元生物技术(上海)股份有限公司。……