臭氧对神经病理性疼痛大鼠脊髓神经元细胞铁死亡的影响

韩晨阳 王慧星 云梦真 史可梅 周国明承德医学院附属医院疼痛科067000；天津医科大学第二医院疼痛治疗中心300

0 引 言

2011年，国际疼痛研究协会将神经病理性疼痛（n europathic pain，N P）的定义更新为：躯体感觉系统的损害或疾病导致的疼痛[1]。NP的发病率约为8%，其可导致长期剧烈疼痛，影响患者生活质量。目前，NP的治疗仍以药物为主，但药物治疗的副作用较大，且疗效一般[2]。近年来，臭氧（O3）被广泛应用于NP治疗，虽取得良好疗效[3]，但O3与NP之间的关系尚不明晰。Dixon等[4]发现了一种非凋亡形式的细胞死亡形式——铁死亡（ferroptosis）。细胞铁死亡的主要特点为线粒体损伤，细胞内脂质活性氧（re active oxygen species，ROS）生成与降解的平衡失调[4-5]。铁死亡诱导剂——Erastin可通过抑制胱氨酸/谷氨酸逆转运蛋白（系统）对胱氨酸的摄取，破坏细胞的抗氧化剂防御系统，最终导致细胞的铁依赖氧化性死亡。而小分子ferrostatin-1（Fer-1）是一种有效的铁死亡抑制剂，可抑制癌细胞铁死亡和谷氨酸诱导的细胞死亡[4]。

由于NP患者体内会出现铁过载[3]和脂质活性氧增多[6]的情况，因此铁死亡途径对NP发生可能起重要作用。本研究中，通过实验分析O3对NP的治疗机理，即O3是否通过抑制铁死亡的发生来治疗NP，从而为NP的治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 主要材料与仪器

戊巴比妥钠（北京迈瑞达科技有限公司），谷胱甘肽过氧化酶4（glutathioneperoxidase4，GPX4）抗体、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（a cyl-CoA synthetase long-chain family member 4，ACSL4）单克隆抗体、神经元特异的抗原（neuronal nuclear antigen，NeuN+）、驴抗小鼠IgGH&L（A lexa Fluor®488）（美国Abcam公司），4'，6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐（4'，6-D iamidino-2-phenylindole dihydrochloride，DAP I）（合肥白鲨生物科技有限公司），组织铁测定试剂盒（南京建成生物工程研究所），防褪色封固剂（北京索莱宝科技有限公司）。……