染色体微阵列分析联合全外显子组测序在胎儿骨骼发育异常产前诊断的应用

王桂喜，胡矩锋

(临沂市妇幼保健院，山东 临沂 276000)

骨骼系统发育异常(Skeletal abnormalities，SA)是人类最常见的出生缺陷之一。其原因包括遗传或环境因素(包括药物或机械作用)[1]。目前，已有学者将染色体微阵列分析技术应用于胎儿SA的产前诊断，与单纯染色体核型分析相比，明显提高了致病基因的检出率[2]。但仍无法检出因单基因病导致的胎儿SA；另外，目前尚未见全外显子组测序(Whole exome sequencing，WES)应用于胎儿SA的报道。本文将核型分析、染色体微阵列分析(Chromosomal microarray analysis，CMA)和WES同时用于产前胎儿SA的临床诊断，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择本院2017年12月—2019年12月因胎儿SA就诊的11例孕妇，孕周18～26周，平均22.55周。所有孕妇均签订知情同意书，胎儿SA均在分娩或引产后经随访证实。

1.2方法 11例孕妇中9例行羊水穿刺，2例直接引产，引产后胎儿组织进行取样。所有病例均行染色体核型+CMA检测，其中4例加用WES检测。染色体核型检测：羊水穿刺病例经接种、培养和收获细胞，采用G显带技术对染色体核型进行染色，计数30个核型，分析5个，遇异常核型则计数分析数量加倍。CMA检测：对引产后的胎儿，取2块组织块(带皮肤的肌肉组织3 cm×3 cm)，抽取胎儿父母静脉血，乙二胺四乙酸真空采血管采血，各5 mL，标本经处理后保存-80℃待测。进行低覆盖度全基因组测序并结合生物信息学分析，准确定位100kb以上的微缺失/微重复片段。若在胎儿组织中检测出100 kb以上与疾病相关的微缺失/微重复，则使用其父母样本用相同方法进行验证。WES检测：提取胎儿组织DNA和父母外周血DNA，所有DNA浓度>50 ng/μL，总量>1.5μg，吸光度(A260/280 nm)为1.8～2.0。后超……