多效唑在核桃仁中的残留测试评估

张美勇 徐颖

摘要：为了解核桃树使用多效唑后核桃仁中的残留量，评估多效唑在核桃园中使用的安全性，于2019年分别以普通核桃品种‘香玲和‘元丰为试材，使用不同剂量（0.8～1.6 g·m-2）、不同浓度（1 000～2 000 mg·L-1）多效唑进行土壤施入或叶面喷施，利用气相色谱-质谱法（GB 23200.8—2016）对多效唑在核桃仁中的最终残留量进行测定。结果表明，叶面喷施和土施处理的残留量均小于0.5 mg·kg-1，其中大部分土施处理的残留量低于0.01 mg·kg-1，叶面喷施处理的残留量低于0.02 mg·kg-1。我国目前还没有核桃仁多效唑残留限量标准，若以最大残留量≤0.5 mg·kg-1（我国现行花生仁残留限量标准）为标准，土壤施入多效唑0.8～1.6 g·m-2或叶面喷施多效唑浓度不超过2 000 mg·L-1，喷施不多于3次，核桃仁中多效唑残留量不超标。

关键词：核桃仁;多效唑;残留量

中图分类号：S664.1  文献标识号：A  文章编号：1001-4942（2020）02-0137-03

Abstract In order to understand the residue of paclobutrazol in walnut kernels and evaluate the safety of paclobutrazol on walnut，two walnut cultivars ‘Xianglingand ‘Yuanfeng were used as materials，and different dosages （0.8～1.6 g·m-2） and concentrations（1 000～2 000 mg·L-1） of paclobutrazol were set for soil application and foliar spraying in 2019. The residue of paclobutrazol in walnut kernels was determined by GC-MS. The results showed that the residual amount of foliar and soil application was less than 0.5 mg·kg-1， and most of the soil and foliar treatments were less than 0.01 and 0.02 mg·kg-1 respectively. There is not the residue limit standard for paclobutrazol in walnut currently in China. If using the maximum residue limit ≤0.5 mg·kg-1 （the current standard of peanut residue in China） as standard， the residual amount of paclobutrazol in walnut kernels did not exceed the standard when soil application at 0.8～1.6 g·m-2 or foliar application at most 2 000 mg·L-1 for no more than 3 times in open field condition.

Keywords Walnut kernel;Paclobutrazol;Residue

山東省核桃栽培面积近17×104 hm2。然而，低产园占种植面积的30%以上，主要原因是栽培密度过大，树形紊乱，通风透光不良，病虫害严重。为解决以上问题，必须进行间伐和树形改造修剪，大力推行宽行密株标准化生产，控制徒长枝的生长是关键措施之一。

多效唑（PP333，paclobutrazol）也称氯丁唑，其分子式为C15H20N3OCl，是一种三唑类植物生长调节剂，主要通过抑制内源GA的生物合成和生理效应，延缓植物生长、抑制枝条伸长、促进枝条增粗及成花坐果等，是一种高效低毒的三唑类化合物，尚无致畸、致癌、致突变的报道，允许摄入量（ADI）为0.1 mg·kg-1[1，2]。研究表明多效唑在落叶果树苹果、桃、樱桃等和常绿果树香蕉、荔枝、杧果等上施用，可控制营养生长、促进成花，丰产稳产[3-8]。但同时多效唑的残留问题也引起人们的关注和担心，因此，科研人员对多效唑在水稻、黄瓜、蕃茄、芒果上的残留问题也进行了研究[9-12]。核桃树施用多效唑，可抑制营养生长，枝条增粗变短，抗寒性增强，冬季修剪量减少，促进结实，提高产量等[13-17]，但是目前还未见多效唑在核桃仁中残留的研究报道，缺乏限量标准。本研究进行了核桃的多效唑叶面喷施浓度以及土壤施用剂量试验，并对其在核桃仁中的残留进行测定和分析，以期为多效唑在核桃上安全合理使用提供支撑。

1 材料与方法

1.1 试验地及材料

试验于2019年3—8月在山东省东平县大羊镇后魏雪村进行。该区位于东平县东北部的九顶山下，东经116°39′，北纬36°10′;土壤为褐土，有机质含量0.5%，pH值7.1。以4年生‘香玲和‘元丰核桃为试材（株行距为4 m×6 m），供试药剂为山东丰倍尔生物科技有限公司的15%多效唑可湿性粉剂。

1.2 施用方法

根据多效唑常用的施用方法、浓度及次数[14-18]，设置整株叶面喷施和土壤施用两种方式。

1.2.1 叶面喷施 设4个浓度处理，分别是清水（0）、1 000、1 500、2 000 mg·L-1，3次重复，共12株树。将多效唑水溶液均匀喷到整株树冠叶片上，首次喷施在一次梢长15 cm左右时进行，间隔15 d，共喷3次。具体时间为2019年4月13、25日和5月11日。

1.2.2 土壤沟施 设4个剂量处理，分别为0、0.8、1.2、1.6 g·m-2。发芽期采用环状沟土施，具体时间是2019年3月27日。

依据农业部《农药登记残留田间试验标准操作规程》要求进行试验操作。所有处理单株小区，3次重复。

1.3 多效唑残留量检测

1.3.1 试样采取 试验样品‘香玲和‘元丰核桃于2019年8月24日果实成熟时采收，每小区单株树冠上、中、下和东、西、南、北各随机采收2个生长正常、无病虫害的果实，脱青皮后，按GB2763附录A取样。将切碎的核桃仁混匀均质成匀浆，分成两份装入洁净的盛样容器内，于-18℃冷冻保存。

1.3.2 测定方法 采用气相色谱-质谱法（GB23200.8—2016）。取20 g核桃仁样品（精度0.01 g）于80 mL离心管中，加40 mL乙腈，用均质器15 000 r/min匀浆提取1 min，加5 g氯化钠，再匀浆提取1 min，放入离心机，3 000 r/min离心5 min，取上清液20 mL（相当于10 g试样量）。Envi-18柱放入固定架上，用10 mL乙腈预洗柱，鸡心瓶下接，加入20 mL提取液，用15 mL乙腈洗柱，将提取液和洗涤液在40℃水浴中旋转浓缩至约1 mL。在Envi-Carb柱中加入约2 cm无水硫酸钠，连接在Sep-Pak氨丙基柱顶部，串联柱下接鸡心瓶放在固定架上。先用4 mL乙腈-甲苯溶液预洗柱，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将样品浓缩液转移至净化柱上，再每次用2 mL乙腈-甲苯溶液洗涤样液瓶3次，并将洗涤液移入柱中。在串联柱上加上50 mL贮液器，用25 mL乙腈-甲苯溶液洗涤串联柱，收集所有流出物于鸡心瓶中，并在40℃水浴中旋转浓缩至约0.5 mL。每次加入5 mL正己烷在40℃水浴中旋转蒸发，进行溶剂交换二次，致样液体积约为1 mL，加40 μL内标溶液混匀，用于气相色谱-质谱测定。

色谱柱为DB-1701（30 m×0.25 mm×0.25 μm）石英毛细管柱，进口温度290℃;进口流量1.2 mL·min-1;柱温40℃ 1 min，然后30℃·min-1升至130℃，5℃·min-1升至250℃，10℃·min-1升至300℃，保持5 min。

离子源温度230℃，GC-MS接口温度280℃，进样口温度290℃，1个定量离子，2～3个定性离子，无分流进样。

1.4 数据分析

采用邓肯氏新复极差法（SSR）做相应试验数据的统计分析。

2 结果与分析

2.1 叶面喷施多效唑在核桃仁中的残留量分析

叶面喷施不同浓度多效唑，各处理的核桃仁中均有微量残留，最高残留量为0.01663 mg·kg-1，但处理间无显著差异，且没有递增规律（表1）。说明叶面喷施1 000、1 500、2 000 mg·L-1多效唑，4月中旬首次喷施，喷施3次，间隔15 d左右，两品种核桃仁的多效唑残留量均在检测限以下。

2.2 土施多效唑在核桃仁中的残留量分析

由表2看出，土壤施用不同剂量的多效唑在两个品种核桃仁中均有微量残留，最高残留量为0.01194 mg·kg-1。随多效唑施用剂量的增加，各处理间并未有明显的递增规律，与对照无显著差异。说明土壤施用0.8、1.2、1.6 g·m-2多效唑处理，核桃仁的多效唑残留量均在检测限以下。

3 讨论与结论

很多国家对多效唑最大残留限量（MRL）作了规定，欧盟2019年1月18日修订实施的树坚果残留限量标准为0.01 mg·kg-1;瑞典禁止在果树上使用多效唑[19]。目前我国尚没有多效唑在核桃仁中的残留限量标准，参照中国花生仁残留限量标准MRL≤0.5 mg·kg-1（GB 2763—2016），本试验中，土施和整株叶面喷施不同剂量多效唑后核桃仁的残留量≤0.5 mg·kg-1，对核桃仁安全。参 考 文 献：

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