刘梦蝶,李志斌,房晓欢,王 卓,聂雨欣,石霖静,李俊杰,2*
(1.河北农业大学 动物科技学院,河北 保定 071000;2.河北省牛羊胚胎技术创新中心,河北 保定 071000)
体细胞核移植(SCNT)技术在加快品种改良、缩短家畜繁殖周期等方面有重要应用,但克隆效率低下,制约着该技术的发展,其中供体细胞不完全重编程是影响SCNT效率的关键因素[1]。DNA甲基化和组蛋白乙酰化是两种重要的表观遗传修饰方式。研究表明,DNA甲基化水平偏高或组蛋白乙酰化水平偏低是SCNT胚胎发育能力低的重要原因[2-3]。Zebularine是DNA甲基转移酶抑制剂,添加Zebularine可显著提高猪[4]、水牛[5]SCNT囊胚发育率;Scriptaid是组蛋白去乙酰化酶抑制剂,处理猪[6]和牛[7]SCNT重构胚,会使胚胎体外发育能力显著提高。河北农业大学动物科技学院繁殖实验室曾利用Zebularine和Scriptaid处理绵羊SCNT胚胎,均显著提高了早期胚胎体外发育能力[8-10]。SCNT胚胎表观遗传修饰异常的根源与供体细胞的分化存在密切联系,供体体细胞核移入去核卵母细胞后需经过表观遗传重编程过程,回到胚胎起始发育的全能状态。为此,Zebularine和Scriptaid处理供体细胞后对SCNT胚胎发育的影响受到广泛关注,Xiong X.等[11]利用Zebularine和Scriptaid处理牛成纤维细胞,增加了牛SCNT胚胎的体外发育潜力和质量。但用Zebularine和Scriptaid等表观遗传修饰试剂处理供体细胞后,对细胞增殖、发育潜能等的影响未见报道,为此,本试验采用Zebularine和Scriptaid处理绵羊卵丘细胞,研究对细胞增殖、多潜能基因、转化生长因子及甲基转移酶等表达的影响,探讨表观遗传修饰试剂提高绵羊SCNT胚胎发育能力的机制,现报道如下。……