铁皮石斛两个DEAD-box RNA解旋酶基因克隆及特征分析

李元敏，李 慧，梁小燕，高 静，沈 霞，颜永刚，李依民，张 岗

(陕西中医药大学 药学院,陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心，西安 712046)

解旋酶(Helicase)是所有生命体中普遍存在的、具有促进双链DNA/RNA解链的驱动蛋白。根据蛋白序列结构域的差异，解旋酶被分为两个主要的超家族SFⅠ和SFⅡ，其中RNA Helicase(RH)在后者中占比较大[1]。第二个基序具有的氨基酸残基天冬氨酸-谷氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(D-E-A-D)特征的一类RH命名为DEAD-box RNA Helicase(DEAD-box RH)[2]。研究表明，DEAD-box RH主要作为RNA分子伴侣，参与RNA转录与翻译及其他加工修饰等一系列代谢过程[3]。

目前，已有大量关于病毒[4]、细菌[5]和动物[6]DEAD-box RH的研究报道，主要涉及RNA复制周期、细胞增殖和分化等功能，临床医学研究揭示RH与肿瘤发生、癌症发展等密切相关。近年来，该基因在植物分子生理学与植物细胞生理学的研究受到关注。如OsRH2和OsRH34在调控水稻株高、花粉与种子发育方面起重要作用[7]。AtRH7是模式植物拟南芥在冷胁迫下生长发育所必需的条件[8]。蕨类问荆的EaRH1基因序列分析揭示其与植物体生理、生化和非生物胁迫应答等相关[9]。植物RH基因研究涉及的药用物种数量目前较局限，大多是关于玉米[1]、水稻[7]、番茄[10]等农作物抗逆生理的研究。

兰科铁皮石斛DendrobiumofficinaleKimura et Migo为多年生植物，以茎入药，具有益胃生津、滋阴清热的功效[11]。其化学成分以多糖、生物碱类为主，同时药理研究揭示其降低血糖、抗肿瘤、调节机体免疫力等方面的作用机制[12]。前期，课题组构建铁皮石斛cDNA文库进行功能基因研究[13]，两条EST C377、C468与植物RH家族成员序列相似性较高。……