ZEB1-AS1在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理特征的关系

宋娇，王利

0 引言

子宫内膜癌（endometrial cancer,EC）是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率呈逐年递增趋势[1]。EC主要通过手术治疗，辅以放疗和化疗，但是越来越多的EC患者出现化疗耐药情况[2]。长链非编码RNA（long non-coding RNAs,lncRNAs）在肿瘤发生和发展过程中起到重要作用，如lncRNA HOTAIR高表达能够促进EC侵袭和转移[3]。ZEB1-AS1与结直肠癌、胃癌和黑色素瘤等多种肿瘤的发生发展有关[4-6]，但是既往鲜有其在EC中的报道，本研究旨在分析EC中ZEB1-AS1的表达及其与临床病理特征的关系，以期揭示其在EC发生和发展中所起的作用。

1 资料与方法

1.1 临床组织标本

收集2010年1月—2016年12月郑州大学第三附属医院医院病理科的195对子宫内膜癌-癌旁正常组织标本。所有患者手术前均未接受放疗或化疗，平均年龄56.7±11.6岁，课题组每6月进行一次电话随访，随访截至2019年1月，最长随访95月，最短1月，中位随访时间为32月。患者相互之间无亲缘关系。

1.2 实时荧光定量PCR

使用ABI 7900HT型PCR仪，Master Mix为美国ABI公司配套试剂,并严格按照说明书配置相关反应体系，2-ΔΔCt法分析qRT-PCR结果；GAPDH作为内参；肿瘤组织相对表达量大于等于中位数（中位数=0.007）为高表达，反之为低表达。

1.3 细胞与试剂

EC细胞系Ishikawa购自中国科学院上海细胞库。使用含10%FBS的DMEM培养基（深圳市百恩维生物科技有限公司），37℃、5%CO2饱和湿度条件下进行培养。细胞裂解液TRIzol购自美国Invitrogen公司，反转录试剂盒购自日本TaKaRa公司。胎牛血清购自上海逍鹏生物科技有限公司；ZEB1-AS1过表达质粒购自上海吉凯基因科技有限公司，转染试剂Lipofectamine 3000购自美国Life Technologies公司；引物于生工生物工程（上海）股份有限公司合成。……