显微镜辅助下结肠区段切除术在裸鼠结肠癌模型中的应用研究

杜继明 王贵鑫 赵雪峰 宫爱民

（大连大学附属新华医院肛肠外科，辽宁 大连 116021）

在动物实验领域，传统的原发性结肠癌及其转移性结肠癌模型的制作远远满足不了飞速发展的肿瘤手术缩小化理念需求，因此建立精准显微镜辅助下手术模型的制作迫在眉睫。近年来临床研究结果中，发现早期结直肠癌选择了以肿瘤为中心的局部切除手术和（或）附加前哨淋巴结清扫，与结肠癌根治性手术相比，其5年生存率无显著差异[1-2]。本研究首选建立稳定的结肠癌模型后，此基础上再建立结肠癌切除手术模型，并与开关手术模型相比较术中、术后情况及生存率情况。由于理论上可行的结肠癌根治手术模型的制作障碍，加上人力、物力及技术上的制约，只好选用了结肠区段切除手术模型。

1 材料与方法

1.1 实验动物和材料：7周龄雄性，体质量18～20 g，BALb/c品系20只实验裸鼠购于大连医科大学实验动物中心。人结肠癌细胞株HT29由大连大学附属新华医院医学研究中心构建并提供。本研究由经大连大学附属新华医院医学研究伦理委员会审批通过。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养和细胞混悬液制备：将人结肠癌细胞株HT29在37 ℃、5%CO2，含10%小牛血清的培养基内传代培养，每2～3 d洗换1次培养液。培养细胞融合达80%～90%，采用胰酶消化后，1200 rpm/min离心3 min，弃上清液，将无小牛血清的培养基加细胞洗涤3次，显微镜下细胞计数，用无小牛血清培养基调整细胞浓度至4×107/mL，共备1 mL。将已制备的细胞混悬液在冰浴中保存，备30 min内完成接种。……